Sterilizimi

Sterilizimi është furnizim, d.m.th. lirimin e plotë objektet mjedisi nga mikroorganizmat dhe sporet e tyre.

Sterilizimi kryhet në mënyra të ndryshme:

1) fizike (ndikimi temperaturë të lartë, Rrezet UV, përdorimi i filtrave bakterial);

2) kimike (përdorimi i dezinfektuesve të ndryshëm, antiseptikët);

3) biologjike (përdorimi i antibiotikëve).

Në praktikën laboratorike, zakonisht përdoren metodat fizike të sterilizimit.

Mundësia dhe përshtatshmëria e përdorimit të një ose një metode tjetër të sterilizimit është për shkak të karakteristikave të materialit që do të sterilizohet, vetive fizike dhe kimike të tij.

Metodat fizike

Kalcinimi në një flakë të ndezjes ose flakërimi është një metodë sterilizimi në të cilën objekti është zbrazur plotësisht, pasi të dy qelizat vegjetative dhe sporet e mikroorganizmave vdesin. Zakonisht, kalcinohen sythe bakteriologjike, shpatulla, pipeta, mikroskop dhe rrëshqitje të mbulesës dhe instrumente të vegjël. Gërshërët dhe bisturitë nuk duhet të sterilizohen nga kalcinimi, pasi sipërfaqja e prerjes bëhet e shurdhër nën ndikimin e zjarrit.

Sterilizimi i nxehtësisë së thatë

Sterilizimi me nxehtësi të thatë ose ajër të nxehtë kryhet në furrat Pasteur (furrat e tharjes). Stufa e Pasteur është një dollap me dy mure i bërë nga materiale rezistente ndaj nxehtësisë - metali dhe azbesti. Kabineti nxehet duke përdorur ndezës gazi ose ngrohës elektrik. Kabinetet me ngrohje elektrike janë të pajisura me rregullatorë për të siguruar temperaturën e kërkuar. Për të kontrolluar temperaturën, ekziston një termometër i futur në vrimë në murin e sipërm të kabinetit.

Lëngjet (media kulturore, tretësira izotonike e klorurit të natriumit, etj.), Objektet e bëra prej gome dhe materialeve sintetike nuk mund të sterilizohen me nxehtësi të thatë, pasi lëngjet ziejnë dhe derdhen, dhe goma dhe materialet sintetike shkrihen.

Sterilizimi vlim

Zierja është një metodë e sterilizimit, e cila garanton se nuk ka spore në materialin e sterilizuar. Ato përdoren për përpunimin e shiringave të instrumenteve, enëve prej qelqi dhe metali, tubave prej gome, etj. Sterilizimi me avull nën presion kryhet në një autoklavë. Kjo metodë e sterilizimit bazohet në ekspozimin e materialeve të sterilizuara ndaj avujve të ngopur të ujit në një presion mbi atmosferën. Si rezultat i një sterilizimi të tillë, me një trajtim të vetëm, të dy format vegjetative dhe spore të mikroorganizmave vdesin. Autoklavë (Fig. 12) - një kazan masiv, i mbuluar nga jashtë me një shtresë metalike, i mbyllur hermetikisht me një kapak, i cili është i dehur fort në kazan me bulona të varur.

Temperatura dhe kohëzgjatja e mediave të kulturës autoklavike përcaktohet nga përbërja e tyre, e specifikuar në recetën për përgatitjen e mjedisit të kulturës. Për shembull, mediat e thjeshta (mesari i mesopatamisë, supa e mezopatamisë) sterilizohen për 20 minuta në 120 ° C (1 atmosferë). Sidoqoftë, në këtë temperaturë, është e pamundur të sterilizohen mjetet që përmbajnë proteina vendase, karbohidrate dhe substanca të tjera që ndryshohen lehtësisht nga ngrohja. Media me karbohidrate sterilizohet fraksionarisht në 100 ° C ose në një autoklavë në 112 ° C (0,5 atm) për 10-15 minuta. Lëngje të ndryshme, pajisje me zorrë gome, priza, qirinj bakterialë dhe filtra sterilizohen për 20 minuta në 120 ° C (1 atm).

Sterilizimi me avull që rrjedh kryhet në një aparat Koch. Kjo metodë përdoret në rastet kur objekti që do të sterilizohet ndryshon në një temperaturë mbi 100 ° C. Mediumet ushqyese që përmbajnë ure, karbohidrate, qumësht, patate, xhelatinë, etj sterilizohen me avull që rrjedh.

Aparati (kazani) i Koch është një cilindër metalik i mbështjellur nga jashtë (për të zvogëluar transferimin e nxehtësisë) me ndjerë ose asbest. Cilindri mbyllet me një kapak konik me një dalje avulli. Ekziston një qëndrim brenda cilindrit, në nivelin e të cilit derdhet uji. Një kovë me një vrimë vendoset në stendë, në të cilën vendoset materiali që do të sterilizohet. Aparati Koch nxehet me gaz ose energji elektrike. Koha e sterilizimit llogaritet nga momenti i lëshimit të fuqishëm të avullit në skajet e kapakut dhe nga dalja e avullit. Sterilizohet brenda 30-60 minutash. Në fund të sterilizimit, ngrohja ndalet. Hiqeni kovën me materialin nga aparati dhe lëreni në temperaturën e dhomës deri të nesërmen. Ngrohja kryhet për 3 ditë rresht në një temperaturë prej 100 ° C për 30-60 minuta. Kjo metodë quhet sterilizim fraksionar. Në ngrohjen e parë, format vegjetative të mikrobeve vdesin, dhe ato spore mbeten. Gjatë ditës, sporet kanë kohë të mbijnë dhe të kthehen në forma vegjetative, të cilat vdesin në ditën e dytë të sterilizimit. Meqenëse është e mundur që disa nga sporet nuk kanë pasur kohë të mbijnë, materiali mbahet edhe për 24 orë, dhe më pas kryhet një sterilizim i tretë. Sterilizimi me avull që rrjedh në aparatin Koch nuk kërkon kontroll të veçantë, pasi treguesi punë korrekte pajisja shërben për sterilitetin e mediave të përgatitura të kulturës. Ju gjithashtu mund të sterilizoni me avull që rrjedh në një autoklavë me kapak të hapur dhe valvulën e kullimit të hapur.

Sterilizimi nga rrezatimi ultraviolet

Sterilizimi nga rrezet UV kryhet duke përdorur instalime të veçanta - llamba baktervrasëse. Rrezet UV kanë aktivitet të lartë antimikrobik dhe mund të shkaktojnë vdekjen e jo vetëm të qelizave vegjetative, por edhe të sporeve. Rrezatimi UV përdoret për të sterilizuar ajrin në spitale, salla operacioni, institucione për fëmijë, etj. Në laboratorin mikrobiologjik, kutia trajtohet me rrezet UV para punës.

Metodat kimike

Ky lloj sterilizimi përdoret në një masë të kufizuar dhe shërben kryesisht për të parandaluar kontaminimin bakterial të mediave të kulturës dhe përgatitjeve imunobiologjike (vaksinat dhe serumet).

Substancat si kloroformi, tolueni, eteri shtohen më shpesh në mediet ushqyese. Nëse është e nevojshme të lirohet mediumi nga këto konservantë, ajo nxehet në një banjë uji në 56 ° C (avujt avullojnë).

Për të ruajtur vaksinat, serumet, përdorni merthiolate, acid borik, formalina, etj.

Sterilizimi biologjik

Sterilizimi biologjik bazohet në përdorimin e antibiotikëve. Kjo metodë përdoret në kultivimin e viruseve.

B. Teknologji e hollësishme për prodhimin e hirrës së bagëtive në thertoret e Lionit

Gjaku tashmë është marrë nga 1.000 kafshë, serumi është futur në shishe dhe gati 20,000 fëmijë janë shpërndarë falas.

Kështu, është treguar se prodhimi industrial i hirrës në një thertore në përputhje me rregullat e asepsës dhe rregulloret sanitare është i mundur.

Kompania e seroterapisë nuk ofron garanci shtesë - nuk ka të drejtë të bëjë autopsinë e kafshës dhuruese.

Teknologjia e përdorur në prodhimin tonë mund të duket më pak e rreptë për sa i përket asepsës sesa metoda klasike. Por ajo ka një avantazh të madh në shpejtësi, pasi që serumi prodhohet plotësisht në ditën e mbledhjes së gjakut.

Nëse rrethanat aktuale na shtynë të prodhojmë serum në thertore, është e qartë se kjo është një masë e përkohshme, pasi hematogjeni dhe serumet medicinale mund të prodhohen vetëm në një institut të specializuar.

Përzgjedhja e kafshëve... Në Lyon, Dr. Gieux, kryeveterineri i thertores, dhe Dr. Fontenay, veterineri inspektor, vetë zgjedhin donatorë nga bagëtia që synojnë të furnizojnë qytetin tonë me mish. Kafsha e zgjedhur është markuar në shpatullën e djathtë për të lehtësuar kontrollin e mëtejshëm.

Pas therjes, organet e kafshëve kontrollohen me kujdes. Një autopsi dihet të jetë metoda më e sigurt për zbulimin e tuberkulozit.

Operacionet e mëvonshme do të tregojnë se serumi i kafshës së sëmurë nuk është konsumuar kurrë.

Marrja e mostrave të gjakut nga kafshët... Në dhomën e mbledhjes së gjakut, demi dhurues mbahet i sigurt nga zgjedha automatike.

Veterineri dezinfekton lëkurën me jod në nivelin e qafës së kafshës dhe bën një prerje në venën jugulare me një bisturi. Bërja venoze kryhet me trokarin e sterilizuar nga vlimi i zgjatur. Sapo shfaqet gjaku, një tub gome i autoklavueshëm është i bashkangjitur në trocar për ta lidhur atë drejtpërdrejt dhe në mënyrë aseptike me defibrinatorin.

Teknologjia dhe metoda e defibrinatorit për sterilizimin e defibrinuesit përshkruhen më poshtë.

Çdo kafshë merr 8-10 litra gjak, i cili peshohet në një ekuilibër nën aparatin.

Metodat e sterilizimit

Për të lehtësuar inspektimin sanitar, secili defibrinator etiketohet me të dhënat e kafshës dhuruese.

Duhet të theksohet se marrja e mostrave të gjakut kryhet në mënyrë aseptike për shkak të qarkut të mbyllur të të gjithëve pjesët përbërëse: trokar, gete gome dhe defibrinator, te cilat para-sterilizohen.

Etiketa e datës së mbledhjes së gjakut shoqëron gjakun e mbledhur që nga koha e bërjes venoze derisa të shndërrohet në serum dhe të ruhet në frigoriferë.

Gjaku defibrinues... Në shumicën e institucioneve të serumit, gjaku i derdhur në enë qelqi ndan serumin nën presionin e një ngarkese. Në këto kushte, gjaku i parë i marrë nga bagëtia përmban pak serum (rreth 10%).

Prandaj, qendra e seroterapisë në Lyon përdor një teknologji të veçantë që jep 50% serum, dhe për më tepër në një kohë më të shkurtër.

Dr. Merier ishte në gjendje ta zhvillojë këtë metodë pjesërisht pas gjetjeve të tij në Institutin Mbretëror në Roterdam dhe në Institutin e Seroterapisë në Milano.

Sapo të merret gjaku në këto institute, ajo defibrinohet në makineri sterile që i ngjajnë furrave të gjalpit.

Brenda 5 minutash, gjaku rrëzohet në një enë të mbrojtur nga ajri. Necessaryshtë e nevojshme të vëzhgoni me saktësi kohën e defibrinimit: me mungesën e saj, mund të ndodhë koagulimi dhe me një tepricë, hemolizë (për shkak të këputjes së eritrociteve). Shtë e nevojshme të përdorni një orë laboratorike që ju lejon të shënoni saktësisht 15 minuta defibrinim.

Në majë të Fig. 4 shihet se numri i mostrave të gjakut ka arritur në 1000, i cili është regjistruar në stemën e Qendrës.

Centrifugimi.

Menjëherë pas defibrinimit, pajisjet transferohen në një laborator të vendosur disa metra larg dhomës së mbledhjes së gjakut. Përmbajtja e secilit defibrinator përpunohet veçmas në mënyrë që serumi i një kafshe të sëmurë të hiqet.

Gjaku pa mpiksje pas defibrinimit kalon përmes një ndarësi Alfa-Laval (një ndarës qumështi që ne kemi adaptuar për prodhimin e hirrës).

Nën veprimin e forcës centrifugale, gjaku është i ndarë në pjesë të barabarta: e kuqja përmban topa të kuq, dhe serum përbërës transparent (fibrina mbetet në fletët defibrinator).

Nga një kafshë, merret 8-10 litra gjak ose rreth 4-5 litra serum, i cili derdhet në një shishe Pyrex, e sterilizuar në 180 ° C.

Një etiketë defibrinatori është e bashkangjitur në shishe, dhe një kartë e kontrollit sanitar plotësohet nën të njëjtin numër.

Një antiseptik i veçantë shtohet në hirrë, i llogaritur në mënyrë që të jetë mjaft aktiv pa prishur transparencën dhe shijen e hirrës. Për 1 litër serum, shtohen edhe 100 ml tretësirë ​​që përmban 1: 1000 formalinë dhe 1: 5000 syunuxol.

(Midis përgatitjeve, centrifuga dezinfektohet plotësisht me një antiseptik.)

Në parim, fraksioni i kuq i gjakut duhet t'u kthehet kasapëve për të bërë suxhuk gjaku, por më së shpeshti mbetet i papërdorur, kështu që mund të përdoret për të përgatitur shurup prej tij duke përdorur teknologjinë e përshkruar më poshtë.

Rastet e veçanta të bërjes së shurupit të gjakut... Shurupi ka dy përparësi: bën të mundur përdorimin e pjesës së kuqe të gjakut që mbetet pas marrjes së serumit dhe ka një shije të këndshme që u pëlqen fëmijëve.

Për shkak të mungesës së glicerinës, është e vështirë të përgatitni një shurup për ruajtje afatgjatë, por mund të bëni një produkt shumë aktiv në ujë dhe t'ua jepni fëmijëve 2-3 lugë gjelle në ditë. 20% e ujit të pijshëm shtohet në pjesën e kuqe të gjakut dhe shurupi ruhet në akullnajat ndërsa kryhet kontrolli sanitar.

Pastaj shtoni një pjesë të barabartë të shurupit të sheqerit 100% (sheqeri mund të merret nga kartat e kolektivave për të cilat është menduar shurupi).

Ekstrakti i limonit ose portokallit shtohet në shurup për të neutralizuar shijen e gjakut dhe shishet në shishe 250 ml.

Tindalizimi i serumit.

Menjëherë pas centrifugimit, domethënë, më pak se një orë pas marrjes së mostrave të gjakut, serumi shtypet i shurdhër në një temperaturë prej 56 ° C për një orë.

Për ta bërë këtë, ajo është zhytur në një banjë uji me një temperaturë të ruajtur automatikisht. Tindallizimi në këtë temperaturë (në një koagulim më të lartë të serumit) është i nevojshëm për sterilizimin e pjesshëm të serumit, megjithëse shpejtësia e përgatitjes së tij në vetvete është një garanci e asepzës.

Duhet të theksohet se çdo kavanoz me 5 litra është i pajisur me etiketën origjinale të defibrinatorit, kështu që numri i serumit korrespondon me numërimin e kafshëve dhuruese.

Kabineti i skedarit të kontrollit... Karta ju lejon të kontrolloni origjinën e kafshës dhuruese, fazat e përgatitjes së hirrës, datën e shishjes, si dhe shpërndarjen e hirrës në çdo kohë.

Kontrolli sanitar... Ndërsa enët ruhen në frigorifer, veterinerët-inspektorët janë të angazhuar në kontrollin sanitar të kafshëve dhuruese. Pasi të jenë therur, kryhet një autopsi e plotë për të zbuluar simptomat më të vogla të tuberkulozit.

Nëse zbulohet një sëmundje, serumi përkatës mund të tërhiqet lehtësisht. Dihet që gjaku i secilës kafshë përpunohet veçmas dhe serumi përmbahet në shishka të ndara, të numëruara.

Qendra e Seroterapisë e Komitetit Publik për Higjenën e Fëmijërisë në Thertoren Lyons

Numri i kontrollit

Hirra e gjedhit në litra

Kartelë dhe etiketë

Karta dhe etiketa e mësipërme parandalon çdo konfuzion.

Në Lyon, masat sanitare janë veçanërisht të rrepta, pasi i njëjti veteriner zgjedh kafshët, tërheq gjak dhe kontrollon mishin.

Sterilizimi i pajisjeve... Serumet e kafshëve janë një terren i shkëlqyeshëm për mikrobet dhe mund të sterilizohen vetëm pjesërisht. Në temperatura mbi 56 °, ato mpiksen dhe bëhen të vrenjtura nëse shtohet një antiseptik i fortë. Prandaj, në të gjitha operacionet e prodhimit të serumit, kërkohet sterilitet maksimal, pajisjet duhet të sigurohen para përdorimit.

Defibrinuesit individualë sterilizohen në mënyrat e mëposhtme: natën para marrjes së mostrave të gjakut, ata janë të mbushur me një solucion antiseptik dhe disa orë para marrjes së mostrave të gjakut, ata lirohen nga antiseptiku duke përdorur një rubinet të vendosur në kostumin e poshtëm të aparatit. Centrifugat e përdorura për të prodhuar hirrë trajtohen gjithashtu me një antiseptik, duke përfshirë midis përpunimit të përmbajtjes së secilit defibrinator.

Në një furrë elektrike në një temperaturë prej 180 ° C, të gjitha qelqet janë sterilizuar, përfshirë enët pesë litërshe për ruajtjen e serumit.

Shishet e serumit prej 250 ml sterilizohen gjithashtu në 180 ° C. Për të thjeshtuar funksionimin, enët janë në kuti që përdoren për shishe dhe shpërndarje për publikun.

shpërndarja e luleve në voskresensk

Sterilizimi përfaqësohet nga metoda fizike, kimike, mekanike dhe biologjike dhe metoda të ndryshme.

Fizibiliteti i përdorimit të një metode të veçantë sterilizimi dhe metodat e saj varet nga karakteristikat e materialit që do të sterilizohet, fizike dhe vetitë kimike.

Kohëzgjatja e sterilizimit varet nga objekti që do të sterilizohet, agjenti sterilizues dhe doza e tij, dhe temperatura dhe lagështia e mjedisit.

Metoda fizike e sterilizimit

Metoda fizike e sterilizimit përfshin tharjen, djegien dhe kalcinimin, vlimin, pasterizimin dhe tyndalizimin, ajrin e nxehtë (nxehtësinë e thatë), ultrazërit, rrezatimin ultraviolet dhe radioaktiv, rrymën me frekuencë të lartë, rrezet e diellit.

Mënyra më e zakonshme për të sterilizuar sendet që i nënshtrohen temperaturave të larta është me zjarr, ajër të nxehtë dhe avull të ngopur nën presion.

Zjarri përdoret për të djegur objekte të infektuara që nuk kanë ndonjë vlerë (letra të panevojshme, letër-muri të vjetër, lecka, mbeturina), për të dezinfektuar pështymën e pacientëve me tuberkuloz, kufomat e njerëzve dhe kafshëve që vdiqën nga infeksione veçanërisht të rrezikshme, si dhe për djegie dhe llogaritjen e objekteve të ndryshme ...

Qitja dhe kalcinimi përdoret gjerësisht në praktikën mikrobiologjike për dezinfektimin e instrumenteve, qelqeve laboratorike dhe farmaceutike.

Kalcinimi në një flakë të ndezjes ose flakërimi është një metodë sterilizimi në të cilën objekti është shteruar plotësisht, pasi qelizat vegjetative, cistet dhe sporet e mikroorganizmave gjithashtu vdesin.

Sythet, shpatullat, pipetat, rrëshqitjet, rrëshqitjet e mbulesave, instrumentet e vegjël dhe sendet e tjera të ndotura zakonisht sterilizohen me kalcinim nëse nuk mund të zihen. Nuk rekomandohet të sterilizohen gërshërët dhe bisturitë me ndezje, pasi sipërfaqja e prerjes bëhet e shurdhër nën ndikimin e zjarrit.

Një nga metodat më të thjeshta dhe më të zakonshme të sterilizimit fizik që përdoret në praktikën mjekësore është sterilizimi me ajër të nxehtë (nxehtësi të thatë). Sterilizimi i nxehtësisë së thatë kryhet në dollapët e tharjes (furrat Pasteur). Ajri i nxehtë i thatë ka një efekt baktervrasës, virucid, sporicid dhe përdoret kryesisht për sterilizimin e enëve të qelqit (enë qelqi laboratorike - enë Petri, balonë, pipeta, epruveta, etj.), Si dhe produkte metalike që mund të sterilizohen nga avulli nën presion.

Përveç kësaj, nxehtësia e thatë përdoret për të sterilizuar sendet e bëra prej porcelani dhe substancave rezistente ndaj nxehtësisë (talk, argjilë e bardhë), si dhe minerale dhe vajra bimorë, yndyrna, vazelinë, lanolinë, dyll. Mënyra më efektive për këtë metodë të sterilizimit, e cila siguron vdekjen e formave vegjetative dhe sporeve, është një temperaturë prej 160 - 180 gradë për 15 minuta.

Ushqyesit, tretësira izotonike, objektet e bëra prej gome dhe materialeve sintetike nuk mund të sterilizohen nga nxehtësia e thatë, pasi lëngjet ziejnë dhe derdhen, dhe materialet prej gome dhe sintetike shkrihen.

Sterilizimi me avull të ngopur nën presion është metoda më e besueshme dhe më e përdorur shpesh për sterilizimin e veshjeve, ujit, disa ilaçeve, mediave të kulturës, pajisjeve të buta, instrumenteve, si dhe për dezinfektimin e mbetjeve të ndotura të materialit.

Në praktikën kirurgjikale, veshjet, fustanet e kirurgëve dhe të brendshmet për pacientin e operuar dezinfektohen me avull në autoklavë. Sterilizimi me avull nën presion kryhet në aparate speciale - autoklavë.

Autoklavimi shkatërron plotësisht të gjithë mikroorganizmat dhe sporet. Metoda e sterilizimit me avull me presion bazohet në ngrohjen e materialit me avull të ngopur në një presion mbi atmosferën. Veprimi i kombinuar i temperaturës së lartë dhe avullit e bën këtë metodë veçanërisht efektive. Në këtë rast, të dy qelizat vegjetative dhe sporet e mikroorganizmave vdesin.

Sporet mikrobiale vdesin brenda 10 minutash nën ndikimin e avujve të ngopur të ujit dhe formave vegjetative - nga 1 në 4 minuta.

Fuqia e lartë baktervrasëse e avullit të ngopur është për shkak të faktit se nën ndikimin e avullit të ujit nën presion, proteinat e qelizës mikrobike fryhen dhe mpiksen, si rezultat i së cilës qelizat mikrobale vdesin.

Efekti baktervrasës i avujve të ngopur të ujit rritet nga presioni i tepërt.

Sterilizimi në një autoklavë kryhet në mënyra të ndryshme.

Pra, mjetet e thjeshta ushqyese (mishi - agar peptoni dhe mishi - supë peptoni) sterilizohen për 20 minuta në 120 gradë (1 atm.). Por në këtë mënyrë, është e pamundur të sterilizohen media që përmbajnë proteina, karbohidrate dhe substanca të tjera që ndryshohen lehtësisht nga ngrohja.

Mediat me karbohidrate sterilizohen në autoklavë në 0,5 atm. 10 - 15 minuta ose avull i pjesshëm që rrjedh.

Me ndihmën e temperaturës së lartë, është e mundur të shkatërrohen format më të qëndrueshme të mikroorganizmave patogjene (përfshirë ato që formojnë spore) jo vetëm në sipërfaqen e objekteve të dezinfektuara, por edhe në thellësitë e tyre.

Ky është përparësia e madhe e temperaturës së lartë si një mjet i besueshëm i sterilizimit. Sidoqoftë, disa objekte përkeqësohen nën ndikimin e temperaturës së lartë dhe në këto raste është e nevojshme të përdoren metoda dhe mjete të tjera të dezinfektimit.

Shterimi i plotë i materialeve dhe objekteve që nuk lejojnë përdorimin e sterilizimit me temperaturë të lartë arrihet me sterilizim të përsëritur me avuj uji në aparatin Koch në një temperaturë që nuk i kalon 100 gradë. Kjo metodë quhet sterilizim fraksionar. Përfundon në faktin se format e mbetura të paforcuara të sporeve të mikrobeve, në një ditë në një termostat në 37 gradë, mbijnë në qeliza vegjetative, vdekja e të cilave ndodh gjatë sterilizimit pasues të këtij objekti me avull që rrjedh.

Përpunimi me avull që rrjedh kryhet tre herë për 30 - 40 minuta. Ngrohja një herë e materialit në temperatura nën 100 gradë njihet si pasterizimi. Pasterizimi është propozuar nga Pasteur dhe synon kryesisht për shkatërrimin e mikroorganizmave kryesisht pa spore. Pasterizimi kryhet në 60 - 70 gradë për 15 deri në 30 minuta, në 80 gradë për 10 deri në 15 minuta.

Në praktikën mikrobiologjike, pasterizimi i inokulit shpesh përdoret për të izoluar kulturat e pastra të mikroorganizmave që formojnë spore dhe për të identifikuar aftësinë e mikroorganizmave për të formuar spore.

Për lëngjet që humbin shijen dhe cilësitë e tjera të vlefshme kur ekspozohen ndaj temperaturave të larta (qumësht, lëngje manaferrash dhe frutash, birrë, media kulturore që përmbajnë karbohidrate ose ure, etj.), Sterilizimi me avull i lëngjeve kryhet në 50 - 60 gradë për 15 - 33333330 minuta ose në 70 - 80 gradë për 5 - 10 minuta. Në të njëjtën kohë, mikrobet e rezistencës mesatare vdesin, dhe më të qëndrueshme dhe spore mbeten.

Sterilizimi fraksionar 5-6 herë në 60 gradë për 1 orë quhet tindalizim.

Shumë pajisje mjekësore të bëra nga materiale polimerike nuk mund të përballojnë sterilizimin me avull sipas mënyrave konvencionale. Për shumë produkte, për shkak të veçorive të lëngjeve që ato përmbajnë (konservantë, ilaçe dhe agjentë të tjerë), është e pamundur të sterilizohet me metoda dhe metoda konvencionale. Për produkte të tilla, mënyrat individuale të sterilizimit janë zhvilluar për të siguruar furnizim të besueshëm të objekteve.

Pra, sterilizimi i rotorit për ndarjen e gjakut në fraksione kryhet me avull uji në një temperaturë prej 120 gradë për 45 minuta.

Steriliteti i kontejnerëve për konservantë arrihet në 110 gradë për 60 minuta.

Vlimi është një metodë sterilizimi e përdorur për të siguruar shiringa të ripërdorshme, instrumente kirurgjikale, tuba gome, enë qelqi dhe metali.

Sterilizimi me zierje kryhet në sterilizues. Format e sporeve vdesin në ujë të valë pas 20 - 30 minutash. Vlimi për 45 minuta përdoret gjerësisht për të dekontaminuar sekrecionet dhe materialet e tjera infektive, liri, enët, lodrat dhe sendet e kujdesit për pacientin.

Uji i nxehtë (60 - 100 gradë) me detergjentë përdoret për larjen dhe pastrimin për heqjen mekanike të papastërtive dhe mikroorganizmave.

Shumica e qelizave vegjetative vdesin në 70 gradë pas 30 minutash.

Sterilizimi me filtrim përdoret në rastet kur substratet nuk mund të përballojnë ngrohjen, në veçanti, për media që përmbajnë proteina, për serume, disa antibiotikë, vitamina, substanca të paqëndrueshme. Kjo teknikë përdoret mjaft gjerësisht për të sterilizuar lëngun e kulturës, kur është e nevojshme të lirohet nga qelizat e mikroorganizmave, por të mbahen të pandryshuara të gjitha produktet metabolike që përmbahen në të.

Metoda konsiston në filtrimin e lëngjeve përmes filtrave të veçantë me ndarje imët poroze dhe për këtë arsye mbajtjen e qelizave të mikroorganizmave.

Më së shpeshti përdoren dy lloje filtrash: filtrat membranorë dhe filtrat Seitz.

Filtrat e membranës bëhen nga kolodioni, acetati, celuloza dhe materiale të tjera.

Filtrat Seitz janë bërë nga një përzierje e azbestit dhe celulozës.

Përveç kësaj, filtrat e bërë nga kaolinë të dopeduar përdoren për sterilizim. rërë kuarci, nga toka infuzorite dhe nga materiale të tjera ("qirinjtë" e Chamberlan, Berkfeld).

Filtrat e membranës dhe azbestit janë krijuar për përdorim të vetëm.

Nën rrezatimin ultraviolet, efekti baktervrasës sigurohet nga rrezet me gjatësi 200 - 450 nm, burimi i të cilave janë llambat baktervrasëse.

Me ndihmën e llambave baktervrasëse, sterilizimi kryhet me rrezet ultraviolet të ajrit në institucionet mjekësore dhe profilaktike, kutitë e laboratorëve mikrobiologjikë, në ndërmarrjet e industrisë ushqimore, në kutitë për prodhimin e vaksinave dhe serumeve, në sallat e operacionit, manipulimet, institucionet e fëmijëve , etj

Rrezet ultraviolet kanë aktivitet të lartë antimikrobik dhe mund të shkaktojnë vdekjen e jo vetëm të qelizave vegjetative, por edhe të sporeve të tyre.

Drita e diellit shkakton vdekjen e mikroorganizmave si rezultat i ekspozimit ndaj rrezatimit ultraviolet dhe tharjes.

Tharja me rrezet e diellit ka një efekt të dëmshëm në shumë lloje të mikroorganizmave, por efekti i tij është sipërfaqësor dhe për këtë arsye rrezet e diellit luajnë një rol ndihmës në praktikën e sterilizimit.

Kohët e fundit, në trajtimin e plagëve dhe djegieve, veshjet nga polimerët sintetikë dhe natyralë janë përdorur në formën e xhelave.

Filmat antiseptikë polimerikë përdoren gjerësisht për trajtimin lokal të plagëve dhe djegieve. Ato përfshijnë agjentë të tillë me spektër të gjerë antimikrobik si katapol, dioksidinë, jod blu dhe sorbitol që përmbajnë glutaraldehid. Për të sterilizuar këto filma, rrezatimi jonizues përdoret në një dozë prej 20.0 kGy. Me prodhimin industrial të filmave poliser antiseptik dhe sorbentit, steriliteti i tyre në këtë mënyrë sterilizimi sigurohet plotësisht.

Rrezatimi radioaktiv vret të gjitha llojet e mikroorganizmave në formë vegjetative dhe spore. Përdoret gjerësisht për sterilizimin në ndërmarrjet që prodhojnë produkte sterile dhe produkte medicinale sterile për përdorim të vetëm, për dezinfektimin e ujërave të ndotura dhe lëndëve të para me origjinë shtazore.

Metoda e sterilizimit mekanik

Metodat e sterilizimit mekanik heqin mikrobet nga sipërfaqja e objekteve. Këto përfshijnë larjen, shkundjen, fshirjen, fshirjen e lagësht, ajrosjen, ajrosjen, pastrimin me korrent dhe larjen.

Metoda e sterilizimit kimik

Në praktikën mjekësore, plastika tani përdoret gjithnjë e më gjerësisht.

Ato përdoren në stomatologji, kirurgji maksilofaciale, traumatologji, ortopedi, kirurgji. Shumica e plastikave nuk i rezistojnë sterilizimit me avull me presion termik dhe nxehtësisë së thatë (ajri i nxehtë i nxehtë). Solucionet e alkoolit, diocidit, tretësirës ternare të përdorura për të sterilizuar objekte të tilla nuk sigurojnë sterilitetin e produkteve të përpunuara.

Prandaj, metodat e gazit dhe rrezatimit, si dhe zgjidhjet e përgatitjeve kimike, përdoren për të sterilizuar produktet plastike.

Futja e një numri të madh të produkteve nga materialet termolabile në praktikën e institucioneve mjekësore kontribuon në futjen e rrezatimit, metodat e gazit të dezinfektimit dhe sterilizimit me zgjidhje të dezinfektuesve.

Në sterilizimin kimik, përdoren gazra dhe agjentë nga grupe të ndryshme kimike (peroksid, fenolik, halogjen, aldehide, alkale dhe acide, surfaktantë, etj.). Për përdorim shtëpiak, prodhohen detergjentë, pastrues, zbardhues dhe ilaçe të tjera që kanë një efekt antimikrobik për shkak të futjes së kimikateve të ndryshme në përbërjen e tyre.

Këto përgatitje përdoren për pastrimin dhe dezinfektimin e pajisjeve sanitare, enëve, lirit etj.

Avulli i formaldehidit (forma e avullit) mund të përdoret në spitalet për sterilizim produkte metalike qëllime mjekësore (bisturitë, gjilpërat, piskatoret, sondat, pirgët, grepat, hapëset e telit, etj.).

Para sterilizimit me avuj të formaldehidit, produktet duhet të para-sterilizohen dhe thahen plotësisht.

Kur sterilizohet me ndonjë metodë kimike, procedura për përpunimin e një objekti varet nga karakteristikat e objektit që do të dezinfektohet, rezistenca e mikrobeve dhe karakteristikat e vetive të tij. përgatitje kimike, temperatura e ambientit, lagështia dhe faktorë të tjerë.

Pra, steriliteti vegla metalike arrihet në pesë orë mbajtje në një dhomë të mbyllur me një banjë me avull në një temperaturë prej të paktën 20 gradë dhe lageshtia relative 95 - 98%, në një temperaturë prej 15 gradë, steriliteti i plotë i këtyre objekteve arrihet vetëm pas 16 orësh.

Aktiviteti sporicid i glutaraldehidës varet nga temperatura. Optimumi i veprimit të tij ndodh në një temperaturë prej 15 - 25 gradë. Me një rritje të temperaturës, aktiviteti i veprimit sporicid të këtij ilaçi zvogëlohet.

Sterilizimi metoda kimike përdorimi është disi i kufizuar. Më shpesh, kjo metodë përdoret për të parandaluar ndotjen bakteriale të mediave të kulturës dhe përgatitjeve imunobiologjike (vaksinat dhe serumet). Substancat si kloroformi, tolueni, eteri shtohen më shpesh në mediet ushqyese. Nëse është e nevojshme të lirohet mediumi nga këto konservantë, ajo nxehet në një banjë uji në 56 gradë dhe konservuesit avullojnë.

Për ruajtjen e vaksinave ose serumeve, përdoren merthiolat, acid borik, formalinë.

Metoda e sterilizimit biologjik

Sterilizimi biologjik bazohet në përdorimin e antibiotikëve.

Kjo metodë përdoret gjerësisht në kultivimin e viruseve.

Sterilizimi (nga latinishtja sterilis - steril) përfshin inaktivizimin e plotë të mikrobeve në objektet që përpunohen.

Furra pasteur - sterilizimi i nxehtësisë së thatë.

Ekzistojnë tre metoda kryesore të sterilizimit: nxehtësia, rrezatimi, kimike.

Jod.

Sterilizimi i nxehtësisë bazohet në ndjeshmërinë e mikrobeve ndaj nxehtësisë.

Në 60 ° C dhe në prani të ujit, ndodh denatyrimi i proteinave, përfshirë enzimat, si rezultat i të cilave format vegjetative të mikrobeve vdesin. Sporet që përmbajnë një sasi shumë të vogël uji në një gjendje të lidhur dhe që kanë membrana të dendura, inaktivohen në 160-170 ° C. Për sterilizimin termik, përdoren kryesisht nxehtësia e thatë dhe avulli me presion.
Sterilizimi i nxehtësisë së thatë kryhet në furra të thata, ose furra Pasteur. Furra Pasteur është një kabinet metalik, i ngushtë, i ngrohur me energji elektrike dhe i pajisur me një termometër.

Dezinfektimi i materialit në të ndodh në 160-170 ° C për 60-120 minuta. Disavantazhi i kësaj metode është se vetëm disa sende të sterilizuara, të tilla si xhami laboratorik, mund të përballojnë një temperaturë kaq të lartë.
Metoda më e gjithanshme e sterilizimit është trajtimi me avull me presion në autoklavë, në të cilin sterilizohen veshjet, liri, shumë instrumente, media kulturore, tretësira, material infektiv, etj.

Një autoklavë është një cilindër metalik me mure të forta, i mbyllur hermetikisht, i përbërë nga një dhomë avulli dhe sterilizuese. Pajisja është e pajisur me një manometër, termometër dhe pajisje të tjera monitorimi. Në autoklavë krijohet një presion i rritur, i cili çon në një rritje të pikës së vlimit të ujit. Pra, në 0,5 atm pika e vlimit është 80 ° С, në 1 atm - 100 ° С, në 2 atm - 121 ° С dhe në 3 atm - 136 ° С.

Për shkak të faktit se, përveç temperaturës së lartë, avulli vepron në mikroorganizmat, sporet vdesin tashmë në 120 ° C. Mënyra më e zakonshme e funksionimit të autoklavës është 2 atm, 121 ° С, 15-20 minuta. Koha e sterilizimit zvogëlohet me rritjen e presionit atmosferik dhe, rrjedhimisht, pikën e vlimit. Mikroorganizmat vdesin në disa sekonda, por materiali përpunohet për një kohë më të gjatë, pasi, së pari, duhet të ketë një temperaturë të lartë brenda materialit të sterilizuar, dhe, së dyti, ekziston një e ashtuquajtur fushë e sigurisë, e krijuar për devijimin e mundshëm nga parametrat e specifikuar në funksionimin e autoklavës.

Etiketat: organizëm, rritje, sterilizim, enzimë

Sterilizimi me nxehtësi të thatë ose ajër të nxehtë kryhet në furrat Pasteur (furrat e tharjes). Stufa e Pasteur është një dollap me dy mure i bërë nga materiale rezistente ndaj nxehtësisë - metali dhe azbesti. Kabineti nxehet duke përdorur ndezës gazi ose ngrohës elektrik. Kabinetet me ngrohje elektrike janë të pajisura me rregullatorë për të siguruar temperaturën e kërkuar. Për të kontrolluar temperaturën, ekziston një termometër i futur në vrimë në murin e sipërm të kabinetit.

Nxehtësia e thatë përdoret për të sterilizuar kryesisht qelqe laboratorike. Enët e përgatitura për sterilizim nuk ngarkohen fort në furrë për të siguruar ngrohje uniforme dhe të besueshme të materialit që do të sterilizohet. Dera e kabinetit është e mbyllur mirë, pajisja e ngrohjes është e ndezur, temperatura sillet në 160-165 ° C dhe në këtë temperaturë ajo sterilizohet për 1 orë. Në fund të sterilizimit, ngrohja është e fikur, por dollapi dera nuk hapet derisa furra të ftohet; përndryshe, ajri i ftohtë që hyn në dollap mund të shkaktojë çarje në enët e nxehta.

Sterilizimi në një furrë Pasteur mund të kryhet në kushte të ndryshme të temperaturës dhe ekspozimit (koha e sterilizimit) (Tabela 1).

Tabela 1. Mënyra e sterilizimit

Lëngjet (media kulturore, tretësira izotonike e klorurit të natriumit, etj.), Objektet e bëra prej gome dhe materialeve sintetike nuk mund të sterilizohen me nxehtësi të thatë, pasi lëngjet ziejnë dhe derdhen, dhe goma dhe materialet sintetike shkrihen.

Për të kontrolluar sterilizimin në një furrë Pasteur, fijet e mëndafshit lagen në një kulturë bakteresh që formojnë spore, thahen, vendosen në një pjatë sterile Petri dhe vendosen në një furrë Pasteur. Sterilizimi kryhet në një temperaturë prej 165 ° C për 1 orë (për kontroll, disa prej fijeve lihen në temperaturën e dhomës). Pastaj fijet e sterilizuara dhe të kontrollit vendosen në sipërfaqen e agarit në një enë Petri ose vendosen në tuba me supë dhe inkubohen në një termostat në 37 ° C për 2 ditë. Me funksionimin e duhur të furrës Pasteur, nuk do të ketë rritje në epruvetat ose enët me mjedisin e kulturës, ku ishin vendosur fijet e sterilizuara, pasi sporet bakteriale do të vdesin, ndërsa sporet bakteriale në fijet që nuk janë sterilizuar (kontrolli) do të do të mbinxehet në rritjen e mediave të kulturës.

Për të përcaktuar temperaturën brenda furrës Pasteur, mund të përdorni saharozë ose sheqer të grimcuar me ushqim, të karamelizuar në një temperaturë prej 165-170 ° C.

Përgatitja e qelqit laboratorik për sterilizim në një furrë Pasteur... Para sterilizimit, enët prej qelqi laboratorike (enët Petri, pipetat e graduara dhe Pasteur, shishka, balonë, epruvetat) duhet të lahen plotësisht, të thahen dhe të mbështillen me letër, përndryshe, pas sterilizimit, përsëri mund të kontaminohet me bakteret e ajrit.

Enët Petri mbështillen në letër një ose disa copa ose vendosen në kuti metalike speciale.

Tamponët e pambukut futen në skajet e sipërme të pipetave për të parandaluar hyrjen e materialit të provës në gojë. Pipetat e graduara mbështillen me shirita të gjata letre me gjerësi 4-5 cm. Vëllimi i pipetës së mbështjellur shënohet në letër. Në rastet e lapsave, pipëzat e graduara sterilizohen pa mbështjellje shtesë letre.

shënim... Nëse gradimi në pipeta është dobët i dukshëm, ai rikthehet para sterilizimit. Bojë vaji aplikohet në një pipetë dhe, pa lejuar që bojë të thahet, pluhuri i sulfatit të bariumit fërkohet në të me një leckë. Pas kësaj, hiqni bojën e tepërt me një leckë, e cila mbetet vetëm në nivelet e diplomimit. Pipetat e trajtuara në këtë mënyrë duhet të shpëlahen.

Skajet e mprehta të pipetave Pasteur vulosen në një flakë të ndezjes dhe mbështillen me letër, 3-5 copa secila. Shtë e nevojshme të mbështillen pipetat e Pasteur me kujdes në mënyrë që të mos prishen skajet e mbyllura të kapilarëve.

Shishkat, balonat, epruvetat mbyllen me tapa me garzë pambuku. Ndalesa duhet të futet në qafën e enës për 2/3 e gjatësisë së saj, jo shumë e ngushtë, por as e lirë. Një kapak letre vendoset në majë të tapave për secilën enë (përveç tubave të provës). Tubat lidhen në 5-50 copë dhe mbështillen mbi letër.

shënim... Në temperatura të larta, letra në të cilën mbështillen gotat dhe pipetat dhe leshi i pambukut bëhet i verdhë dhe madje mund të karbonizohet, kështu që secila larmi e re Letrat e prodhuara në laborator duhet të testohen në kushtet e pranuara të temperaturës.

Pyetjet e kontrollit

1. Çfarë nënkuptohet me termin sterilizim?

2. Cilat metoda përdoren për sterilizimin?

3. Çfarë sterilizohet nga kalcinimi mbi një zjarr?

4. Përshkruani pajisjen dhe mënyrën e funksionimit të furrës Pasteur.

5. Çfarë sterilizohet në furrën Pasteur?

6. Si përgatiten enët prej qelqi për sterilizim?

7. Pse nuk mund të sterilizohen mjetet e kulturës dhe sendet prej gome në një furrë Pasteur?

Detyrë

Përgatitni enët Petri, pipetat e graduara, pipetat Pasteur, epruvetat, balonat dhe shishet për sterilizim.

Sterilizimi përfaqësohet nga metoda fizike, kimike, mekanike dhe biologjike dhe metoda të ndryshme. Realizimi i përdorimit të një metode të veçantë sterilizimi dhe metodat e saj varet nga karakteristikat e materialit që do të sterilizohet, vetitë e tij fizike dhe kimike. Kohëzgjatja e sterilizimit varet nga objekti që do të sterilizohet, agjenti sterilizues dhe doza e tij, dhe temperatura dhe lagështia e mjedisit.

Metoda fizike e sterilizimit Metoda fizike e sterilizimit përfshin tharjen, djegien dhe kalcinimin, vlimin, pasterizimin dhe tyndalizimin, ajrin e nxehtë (nxehtësinë e thatë), ultrazërit, rrezatimin ultraviolet dhe radioaktiv, rrymën me frekuencë të lartë, rrezet e diellit. Mënyra më e zakonshme për të sterilizuar sendet që i nënshtrohen temperaturave të larta është me zjarr, ajër të nxehtë dhe avull të ngopur nën presion. Zjarri përdoret për të djegur objekte të infektuara që nuk kanë ndonjë vlerë (letra të panevojshme, letër-muri të vjetër, lecka, mbeturina), për të dezinfektuar pështymën e pacientëve me tuberkuloz, kufomat e njerëzve dhe kafshëve që vdiqën nga infeksione veçanërisht të rrezikshme, si dhe për djegie dhe llogaritjen e objekteve të ndryshme ... Qitja dhe kalcinimi përdoret gjerësisht në praktikën mikrobiologjike për dezinfektimin e instrumenteve, qelqeve laboratorike dhe farmaceutike. Kalcinimi në një flakë të ndezjes ose flakërimi është një metodë sterilizimi në të cilën objekti është shteruar plotësisht, pasi qelizat vegjetative, cistet dhe sporet e mikroorganizmave gjithashtu vdesin. Sythet, shpatullat, pipetat, rrëshqitjet, rrëshqitjet e mbulesave, instrumentet e vegjël dhe sendet e tjera të ndotura zakonisht sterilizohen me kalcinim nëse nuk mund të zihen. Nuk rekomandohet të sterilizohen gërshërët dhe bisturitë me ndezje, pasi sipërfaqja e prerjes bëhet e shurdhër nën ndikimin e zjarrit. Një nga metodat më të thjeshta dhe më të zakonshme të sterilizimit fizik që përdoret në praktikën mjekësore është sterilizimi me ajër të nxehtë (nxehtësi të thatë). Sterilizimi i nxehtësisë së thatë kryhet në dollapët e tharjes (furrat Pasteur). Ajri i nxehtë i thatë ka një efekt baktervrasës, virucid, sporicid dhe përdoret kryesisht për sterilizimin e enëve të qelqit (enë qelqi laboratorike - enë Petri, balonë, pipeta, epruveta, etj.), Si dhe produkte metalike që mund të sterilizohen nga avulli nën presion. Përveç kësaj, nxehtësia e thatë përdoret për të sterilizuar objektet e bëra prej porcelani dhe substancave rezistente ndaj nxehtësisë (talk, argjilë e bardhë), si dhe vajra minerale dhe bimore, yndyrna, vazelinë, lanolinë, dyll. Mënyra më efektive për këtë metodë të sterilizimit, e cila siguron vdekjen e formave vegjetative dhe sporeve, është një temperaturë prej 160 - 180 gradë për 15 minuta. Ushqyesit, tretësira izotonike, objektet e bëra prej gome dhe materialeve sintetike nuk mund të sterilizohen nga nxehtësia e thatë, pasi lëngjet ziejnë dhe derdhen, dhe materialet prej gome dhe sintetike shkrihen. Sterilizimi me avull të ngopur nën presion është metoda më e besueshme dhe më e përdorur shpesh për sterilizimin e veshjeve, ujit, disa ilaçeve, mediave të kulturës, pajisjeve të buta, instrumenteve, si dhe për dezinfektimin e mbetjeve të ndotura të materialit. Në praktikën kirurgjikale, veshjet, fustanet e kirurgëve dhe të brendshmet për pacientin e operuar dezinfektohen me avull në autoklavë. Sterilizimi me avull nën presion kryhet në aparate speciale - autoklavë. Autoklavimi shkatërron plotësisht të gjithë mikroorganizmat dhe sporet. Metoda e sterilizimit me avull me presion bazohet në ngrohjen e materialit me avull të ngopur në një presion mbi atmosferën. Veprimi i kombinuar i temperaturës së lartë dhe avullit e bën këtë metodë veçanërisht efektive. Në këtë rast, të dy qelizat vegjetative dhe sporet e mikroorganizmave vdesin. Sporet mikrobiale vdesin brenda 10 minutash nën ndikimin e avujve të ngopur të ujit dhe formave vegjetative - nga 1 në 4 minuta. Fuqia e lartë baktervrasëse e avullit të ngopur është për shkak të faktit se nën ndikimin e avullit të ujit nën presion, proteinat e qelizës mikrobike fryhen dhe mpiksen, si rezultat i së cilës qelizat mikrobale vdesin. Efekti baktervrasës i avujve të ngopur të ujit rritet nga presioni i tepërt. Sterilizimi në një autoklavë kryhet në mënyra të ndryshme. Pra, mjetet e thjeshta ushqyese (mishi - agar peptoni dhe mishi - supë peptoni) sterilizohen për 20 minuta në 120 gradë (1 atm.). Por në këtë mënyrë, është e pamundur të sterilizohen media që përmbajnë proteina, karbohidrate dhe substanca të tjera që ndryshohen lehtësisht nga ngrohja. Mediat me karbohidrate sterilizohen në autoklavë në 0,5 atm. 10 - 15 minuta ose avull i pjesshëm që rrjedh. Me ndihmën e temperaturës së lartë, është e mundur të shkatërrohen format më të qëndrueshme të mikroorganizmave patogjene (përfshirë ato që formojnë spore) jo vetëm në sipërfaqen e objekteve të dezinfektuara, por edhe në thellësitë e tyre. Ky është përparësia e madhe e temperaturës së lartë si një mjet i besueshëm i sterilizimit. Sidoqoftë, disa objekte përkeqësohen nën ndikimin e temperaturës së lartë dhe në këto raste është e nevojshme të përdoren metoda dhe mjete të tjera të dezinfektimit. Shterimi i plotë i materialeve dhe objekteve që nuk lejojnë përdorimin e sterilizimit me temperaturë të lartë arrihet me sterilizim të përsëritur me avuj uji në aparatin Koch në një temperaturë që nuk i kalon 100 gradë. Kjo metodë quhet sterilizim fraksionar. Përfundon në faktin se format e mbetura të paforcuara të sporeve të mikrobeve, në një ditë në një termostat në 37 gradë, mbijnë në qeliza vegjetative, vdekja e të cilave ndodh gjatë sterilizimit pasues të këtij objekti me avull që rrjedh. Përpunimi me avull që rrjedh kryhet tre herë për 30 - 40 minuta. Ngrohja një herë e materialit në temperatura nën 100 gradë njihet si pasterizimi. Pasterizimi është propozuar nga Pasteur dhe synon kryesisht për shkatërrimin e mikroorganizmave kryesisht pa spore. Pasterizimi kryhet në 60 - 70 gradë për 15 deri në 30 minuta, në 80 gradë për 10 deri në 15 minuta. Në praktikën mikrobiologjike, pasterizimi i inokulit shpesh përdoret për të izoluar kulturat e pastra të mikroorganizmave që formojnë spore dhe për të identifikuar aftësinë e mikroorganizmave për të formuar spore. Për lëngjet që humbin shijen dhe cilësitë e tjera të vlefshme kur ekspozohen ndaj temperaturave të larta (qumësht, lëngje manaferrash dhe frutash, birrë, media kulturore që përmbajnë karbohidrate ose ure, etj.), Sterilizimi me avull i lëngjeve kryhet në 50 - 60 gradë për 15 - 33333330 minuta ose në 70 - 80 gradë për 5 - 10 minuta. Në të njëjtën kohë, mikrobet e rezistencës mesatare vdesin, dhe më të qëndrueshme dhe spore mbeten. Sterilizimi fraksionar 5-6 herë në 60 gradë për 1 orë quhet tindalizim. Shumë pajisje mjekësore të bëra nga materiale polimerike nuk mund të përballojnë sterilizimin me avull sipas mënyrave konvencionale. Për shumë produkte, për shkak të veçorive të lëngjeve që ato përmbajnë (konservantë, ilaçe dhe agjentë të tjerë), është e pamundur të sterilizohet me metoda dhe metoda konvencionale. Për produkte të tilla, mënyrat individuale të sterilizimit janë zhvilluar për të siguruar furnizim të besueshëm të objekteve. Pra, sterilizimi i rotorit për ndarjen e gjakut në fraksione kryhet me avull uji në një temperaturë prej 120 gradë për 45 minuta. Steriliteti i kontejnerëve për konservantë arrihet në 110 gradë për 60 minuta. Vlimi është një metodë sterilizimi që përdoret për të siguruar shiringa të ripërdorshme, instrumente kirurgjikale, tuba gome, enë qelqi dhe metali. Sterilizimi me zierje kryhet në sterilizues. Format e sporeve vdesin në ujë të valë pas 20 - 30 minutash. Vlimi për 45 minuta përdoret gjerësisht për të dekontaminuar sekrecionet dhe materialet e tjera infektive, liri, enët, lodrat dhe sendet e kujdesit për pacientin. Uji i nxehtë (60 - 100 gradë) me detergjentë përdoret për larjen dhe pastrimin për heqjen mekanike të papastërtive dhe mikroorganizmave. Shumica e qelizave vegjetative vdesin në 70 gradë pas 30 minutash. Sterilizimi me filtrim përdoret në rastet kur substratet nuk mund të përballojnë ngrohjen, në veçanti, për media që përmbajnë proteina, për serume, disa antibiotikë, vitamina, substanca të paqëndrueshme. Kjo teknikë përdoret mjaft gjerësisht për të sterilizuar lëngun e kulturës, kur është e nevojshme të lirohet nga qelizat e mikroorganizmave, por të mbahen të pandryshuara të gjitha produktet metabolike që përmbahen në të. Metoda konsiston në filtrimin e lëngjeve përmes filtrave të veçantë me ndarje imët poroze dhe për këtë arsye mbajtjen e qelizave të mikroorganizmave. Më së shpeshti përdoren dy lloje filtrash: filtrat membranorë dhe filtrat Seitz. Filtrat e membranës bëhen nga kolodioni, acetati, celuloza dhe materiale të tjera. Filtrat Seitz janë bërë nga një përzierje e azbestit dhe celulozës. Përveç kësaj, për sterilizim, filtrat përdoren të bërë nga kaolinë të përzier me rërë kuarci, nga toka infuzore dhe nga materiale të tjera ("qirinjtë" e Chamberlan, Berkfeld). Filtrat e membranës dhe azbestit janë krijuar për përdorim të vetëm. Nën rrezatimin ultraviolet, efekti baktervrasës sigurohet nga rrezet me gjatësi 200 - 450 nm, burimi i të cilave janë llambat baktervrasëse. Me ndihmën e llambave baktervrasëse, sterilizimi kryhet me rrezet ultraviolet të ajrit në institucionet mjekësore dhe parandaluese, kuti laboratorësh mikrobiologjikë, në ndërmarrjet e industrisë ushqimore, në kuti për prodhimin e vaksinave dhe serumeve, në sallat e operacioneve, sallat e operacionit, fëmijët institucionet, etj. Rrezet ultraviolet kanë aktivitet të lartë antimikrobik dhe mund të shkaktojnë vdekjen e jo vetëm të qelizave vegjetative, por edhe të sporeve të tyre. Drita e diellit shkakton vdekjen e mikroorganizmave si rezultat i ekspozimit ndaj rrezatimit ultraviolet dhe tharjes. Tharja me rrezet e diellit ka një efekt të dëmshëm në shumë lloje të mikroorganizmave, por efekti i tij është sipërfaqësor dhe për këtë arsye rrezet e diellit luajnë një rol ndihmës në praktikën e sterilizimit. Kohët e fundit, në trajtimin e plagëve dhe djegieve, veshjet nga polimerët sintetikë dhe natyralë janë përdorur në formën e xhelave. Filmat antiseptikë polimerikë përdoren gjerësisht për trajtimin lokal të plagëve dhe djegieve. Ato përfshijnë agjentë të tillë me spektër të gjerë antimikrobik si katapol, dioksidinë, jod blu dhe sorbitol që përmbajnë glutaraldehid. Për të sterilizuar këto filma, rrezatimi jonizues përdoret në një dozë prej 20.0 kGy. Me prodhimin industrial të filmave poliser antiseptik dhe sorbentit, steriliteti i tyre në këtë mënyrë sterilizimi sigurohet plotësisht. Rrezatimi radioaktiv vret të gjitha llojet e mikroorganizmave në formë vegjetative dhe spore. Përdoret gjerësisht për sterilizimin në ndërmarrjet që prodhojnë produkte sterile dhe produkte medicinale sterile për përdorim të vetëm, për dezinfektimin e ujërave të ndotura dhe lëndëve të para me origjinë shtazore.

Metoda e sterilizimit mekanik Metodat e sterilizimit mekanik heqin mikrobet nga sipërfaqja e objekteve. Këto përfshijnë larjen, shkundjen, fshirjen, fshirjen e lagësht, ajrosjen, ajrosjen, pastrimin me korrent dhe larjen.

Metoda e sterilizimit kimik Në praktikën mjekësore, plastika tani përdoret gjithnjë e më gjerësisht. Ato përdoren në stomatologji, kirurgji maksilofaciale, traumatologji, ortopedi, kirurgji. Shumica e plastikave nuk i rezistojnë sterilizimit me avull me presion termik dhe nxehtësisë së thatë (ajri i nxehtë i nxehtë). Solucionet e alkoolit, diocidit, tretësirës ternare të përdorura për të sterilizuar objekte të tilla nuk sigurojnë sterilitetin e produkteve të përpunuara. Prandaj, metodat e gazit dhe rrezatimit, si dhe zgjidhjet e përgatitjeve kimike, përdoren për të sterilizuar produktet plastike. Futja e një numri të madh të produkteve nga materialet termolabile në praktikën e institucioneve mjekësore kontribuon në futjen e rrezatimit, metodat e gazit të dezinfektimit dhe sterilizimit me zgjidhje të dezinfektuesve. Në sterilizimin kimik, përdoren gazra dhe agjentë nga grupe të ndryshme kimike (peroksid, fenolik, halogjen, aldehide, alkale dhe acide, surfaktantë, etj.). Për përdorim shtëpiak, prodhohen detergjentë, pastrues, zbardhues dhe ilaçe të tjera që kanë një efekt antimikrobik për shkak të futjes së kimikateve të ndryshme në përbërjen e tyre. Këto përgatitje përdoren për pastrimin dhe dezinfektimin e pajisjeve sanitare, enëve, lirit etj. .). Para sterilizimit me avuj të formaldehidit, produktet duhet të para-sterilizohen dhe thahen plotësisht. Kur sterilizohet me ndonjë metodë kimike, procedura për përpunimin e një objekti varet nga karakteristikat e objektit që do të dezinfektohet, rezistenca e mikrobeve, karakteristikat e vetive të preparatit kimik, temperatura e ambientit, lagështia dhe faktorë të tjerë. Pra, steriliteti i instrumenteve metalikë arrihet në pesë orë mbajtje në një dhomë të mbyllur me një avull në një temperaturë prej të paktën 20 gradë dhe një lagështi relative prej 95 - 98%, në një temperaturë prej 15 gradë, sterilitet i plotë i këtyre objektet arrihen vetëm pas 16 orësh. Aktiviteti sporicid i glutaraldehidës varet nga temperatura. Optimumi i veprimit të tij ndodh në një temperaturë prej 15 - 25 gradë. Me një rritje të temperaturës, aktiviteti i veprimit sporicid të këtij ilaçi zvogëlohet. Përdorimi i sterilizimit kimik është disi i kufizuar. Më shpesh, kjo metodë përdoret për të parandaluar ndotjen bakteriale të mediave të kulturës dhe përgatitjeve imunobiologjike (vaksinat dhe serumet). Substancat si kloroformi, tolueni, eteri shtohen më shpesh në mediet ushqyese. Nëse është e nevojshme të lirohet mediumi nga këto konservantë, ajo nxehet në një banjë uji në 56 gradë dhe konservuesit avullojnë. Për ruajtjen e vaksinave ose serumeve, përdoren merthiolat, acid borik, formalinë.

Metoda e sterilizimit biologjik Sterilizimi biologjik bazohet në përdorimin e antibiotikëve. Kjo metodë përdoret gjerësisht në kultivimin e viruseve.

Jeta e mikroorganizmave varet ngushtë nga kushtet e mjedisit. Të gjithë faktorët mjedisorë që ndikojnë në mikroorganizmat mund të ndahen në tre grupe: fizike, kimike dhe biologjike, efekti i dobishëm ose shkatërrues i të cilave varet si nga vetë natyra e faktorit ashtu edhe nga vetitë e mikroorganizmit.

Faktorët fizikë

Nga faktorët fizikë, ndikimi më i madh në zhvillimin e mikroorganizmave ushtrohet nga temperatura, tharja, energjia rrezatuese dhe ultrazëri.

Temperatura... Aktiviteti jetësor i secilit mikroorganizëm është i kufizuar nga kufij të caktuar të temperaturës. Kjo varësi e temperaturës shprehet zakonisht nga tre pika kryesore: minimale - temperatura nën të cilën ndalet shumëzimi i qelizave mikrobike; optimale - temperatura më e mirë për rritjen dhe zhvillimin e mikroorganizmave; maksimumi - temperatura mbi të cilën dobësohet ose ndalet aktiviteti jetësor i qelizave. Temperatura optimale zakonisht korrespondon me kushtet e temperaturës së habitatit natyror.

Të gjithë mikroorganizmat në lidhje me temperaturën ndahen në psikrofile, mezofile dhe termofile.

Psikrofilët (nga psikrot grekë - ftohtë, filo - unë dua), ose mikroorganizma të ftohtë, rriten me një relativisht temperaturat e ulëta: temperatura minimale- 0 ° С, optimale - 10-20 ° С, maksimumi - 30 ° С. Ky grup përfshin mikroorganizmat që jetojnë në detet veriore dhe oqeanet, tokën, ujë i mbeturinave... Kjo gjithashtu përfshin baktere të ndritshme dhe hekuri, si dhe mikrobe që shkaktojnë prishjen e ushqimit në të ftohtë (nën 0 ° C).

Mesofilet (nga greqishtja mesos - mes) janë grupi më i gjerë, duke përfshirë shumicën e saprofiteve dhe të gjithë mikroorganizmat patogjenë. Temperatura optimale për ta është 28-37 ° C, minimumi është 10 ° C, maksimumi është 45 ° C.

Termofilet (nga termat grekë - nxehtësia, nxehtësia), ose mikroorganizmat termofilikë, zhvillohen në temperatura mbi 55 ° C, temperatura minimale për ta është 30 ° C, optimali është 50-60 ° C dhe maksimumi është 70-75 ° C. Ato gjenden në burimet e nxehta minerale, shtresën sipërfaqësore të tokës, nënshtresat vetë-ngrohëse (plehu, sana, drithi), zorrët e njerëzve dhe kafshëve. Ka shumë forma spore midis termofileve.

Temperaturat e larta dhe të ulëta kanë efekte të ndryshme në mikroorganizmat. Disa janë më të ndjeshëm ndaj temperaturave të larta. Për më tepër, sa më e lartë të jetë temperatura jashtë maksimumit, aq më shpejt ndodh vdekja e qelizave mikrobike, e cila është për shkak të denatyrimit (koagulimit) të proteinave qelizore.

Format vegjetative të baktereve mezofile vdesin në një temperaturë prej 60 ° C brenda 30-60 minutash, dhe në 80-100 ° C - pas 1-2 minutash. Sporet bakteriale janë shumë më rezistente ndaj temperaturave të larta. Për shembull, sporet e bacileve të antraksit i rezistojnë zierjes për 10-20 minuta, dhe sporet e botulizmit të klostridiumit - 6 orë. Të gjithë mikroorganizmat, përfshirë sporet, vdesin në një temperaturë prej 165-170 ° C brenda një ore (në një kabinet të nxehtësisë së thatë) ose kur ekspozohet ndaj avullit nën presion prej 1 atm (në autoklavë) për 30 min.

Veprimi i temperaturave të larta në mikroorganizmat është baza për sterilizimin - çlirimi i plotë i objekteve të ndryshme nga mikroorganizmat dhe sporet e tyre (shih më poshtë).

Shumë mikroorganizma janë jashtëzakonisht rezistentë ndaj temperaturave të ulëta. Salmonella e tifos dhe kolera Vibrio mbijetojnë për një kohë të gjatë në akull. Disa mikroorganizma mbeten të vlefshëm në temperaturat e ajrit të lëngët (-190 ° C), dhe sporet bakteriale mund të përballojnë temperaturat deri në -250 ° C.

Vetem lloje të caktuara Bakteret patogjene janë të ndjeshme ndaj temperaturave të ulëta (për shembull, bordetella pertussis dhe para-pertussis, Neisseria meningococcus, etj.). Këto veti të mikroorganizmave merren parasysh në diagnostifikimi laboratorik dhe gjatë transportimit të materialit provë, ai dorëzohet në laboratorin e mbrojtur nga ftohja.

Veprimi i temperaturave të ulëta pezullon proceset kalbëse dhe fermentuese, të cilat përdoren gjerësisht për të ruajtur ushqimin në frigoriferë, bodrume, akullnaja. Në temperatura nën 0 ° C, mikrobet bien në një gjendje të animacionit të pezulluar - proceset metabolike ngadalësohen dhe riprodhimi ndalet. Sidoqoftë, në prani të kushteve të përshtatshme të temperaturës dhe një mediumi ushqyes, funksionet vitale të qelizave mikrobike rikthehen. Kjo veti e mikroorganizmave përdoret në praktikën laboratorike për të ruajtur kulturat mikrobike në temperatura të ulëta. Një ndryshim i shpejtë i temperaturave të larta dhe të ulëta (ngrirja dhe shkrirja) gjithashtu ka një efekt të dëmshëm në mikroorganizmat - kjo çon në këputje të membranave qelizore.

Tharje... Për funksionimin normal të mikroorganizmave, uji është i nevojshëm. Tharja çon në dehidrim të citoplazmës, prishje të integritetit të membranës citoplazmike, si rezultat i së cilës prishet ushqyerja e qelizave mikrobike dhe ndodh vdekja e tyre.

Koha e vdekjes së llojeve të ndryshme të mikroorganizmave nën ndikimin e tharjes është dukshëm e ndryshme. Kështu, për shembull, Neisseria patogjene (meningokoket, gonokoket), leptospira, treponema pallidum dhe të tjerët vdesin në tharje pas disa minutash. Vibrio kolera mund të përballojë tharjen për 2 ditë, Tifus Salmonella - 70 ditë dhe Mycobacterium tuberculosis - 90 ditë. Por pështyma e tharë e pacientëve me tuberkuloz, në të cilën patogjenët mbrohen nga një mbështjellës i thatë proteina, mbetet ngjitës për 10 muaj.

Sporet janë veçanërisht rezistente ndaj tharjes, si dhe ndaj ndikimeve të tjera mjedisore. Sporet e bacileve të antraksit ruajnë aftësinë për të mbirë për 10 vjet, dhe sporet e mykut - deri në 20 vjet.

Efekti i pafavorshëm i tharjes në mikroorganizmat është përdorur prej kohësh për ruajtjen e perimeve, frutave, mishit, peshkut dhe bimëve medicinale. Në të njëjtën kohë, një herë në kushte të lagështisë së lartë, produkte të tilla përkeqësohen shpejt për shkak të rivendosjes së aktivitetit jetësor të mikrobeve.

Tharja me ngrirje përdoret gjerësisht për të ruajtur kulturat e mikroorganizmave, vaksinave dhe përgatitjeve të tjera biologjike. Thelbi i metodës është që mikroorganizmat ose përgatitjet t'i nënshtrohen paraprakisht ngrirjes, dhe pastaj ato të thahen në kushte vakumi. Në këtë rast, qelizat mikrobike kalojnë në një gjendje të animacionit të pezulluar dhe mbajnë vetitë e tyre biologjike për disa muaj ose vite.

Energji rrezatuese... Në natyrë, mikroorganizmat janë vazhdimisht të ekspozuar ndaj rrezatimit diellor. Drita e drejtpërdrejtë e diellit shkakton vdekjen e shumë mikroorganizmave brenda pak orësh, me përjashtim të baktereve fotosintetike (bakteret e squfurit jeshile dhe vjollcë). Efekti shkatërrues i rrezeve të diellit është për shkak të aktivitetit të rrezeve ultraviolet (rrezet UV). Ata inaktivizojnë enzimat qelizore dhe dëmtojnë ADN-në. Bakteret patogjene janë më të ndjeshme ndaj rrezeve UV sesa saprofitet. Prandaj, është më mirë të ruhen kulturat mikrobike në laborator në errësirë. Përvoja e Buchner është demonstrative në këtë drejtim.

Në një pjatë Petri me një shtresë të hollë agari, bëhet një inokulim i bollshëm i çdo kulture bakteresh. Në pjesën e jashtme të kupës me farë, letrat e prera nga letra e zezë ngjiten për të formuar, për shembull, fjalën "tifos". Kupa, me kokë poshtë, është e ekspozuar ndaj rrezeve të diellit për 1 orë. Pastaj letrat hiqen dhe kupa vendoset në një termostat në 37 ° C për një ditë. Rritja e baktereve vërehet vetëm në ato vende të agarit që mbroheshin nga rrezet UV me shkronja të ngjitura. Pjesa tjetër e agarit mbetet transparente, domethënë, rritja e mikroorganizmave mungon (Fig. 11).

Rëndësia e dritës së diellit si një faktor natyror në përmirësimin e mjedisit të jashtëm është e madhe. Ajo çliron ajrin, ujin "e rezervuarëve natyralë, shtresat e sipërme të tokës nga bakteret patogjene".

Efekti baktervrasës (bakteret shkatërruese) të rrezeve UV përdoret për të sterilizuar ajrin e brendshëm (sallat e operacionit, dhomat e zhveshjes, kutitë, etj.), Si dhe ujin dhe qumështin. Burimet e këtyre rrezeve janë llambat ultraviolet, llambat mikrobvrasëse.

Llojet e tjera të energjisë rrezatuese - rrezet X, rrezet α-, β-, γ kanë një efekt shkatërrues në mikroorganizmat vetëm në doza të mëdha, të rendit 440-280 J / kg. Vdekja e mikrobeve është për shkak të shkatërrimit të strukturave bërthamore dhe ADN-së qelizore. Doza të vogla të rrezatimit stimulojnë rritjen e qelizave mikrobike. Mikroorganizmat janë shumë më rezistentë ndaj rrezatimit radioaktiv sesa organizmat më të lartë. Bakteret tionike janë të njohura që jetojnë në depozitat e mineralit të uraniumit. Bakteret u gjetën në ujin e reaktorëve bërthamorë në një përqendrim rrezatimi jonizues prej 20-30 kJ / kg.

Efekti baktervrasës i rrezatimit jonizues përdoret për ruajtjen e disa produkteve ushqimore, sterilizimin e përgatitjeve biologjike (serume, vaksina, etj.), Ndërsa vetitë e materialit të sterilizuar nuk ndryshojnë.

NË vitet e fundit metoda e rrezatimit përdoret për të sterilizuar produktet e disponueshme - pipetat e polisterolit, enët Petri, puset për reaksione serologjike, shiringat, si dhe materialin e qepjes - katagut, etj.

Ekografia shkakton dëme të konsiderueshme në qelizën mikrobike. Nën veprimin e ultrazërit, aktivizohen gazrat në mjedisin e lëngët të citoplazmës dhe a shtypje e lartë(deri në 10,000 atm). Kjo çon në këputje të membranës qelizore dhe vdekje qelizore. Ekografia përdoret për të sterilizuar ushqimin (qumësht, lëngje frutash), ujë të pijshëm.

Shtypje e lartë... Bakteret dhe sidomos sporet e tyre janë rezistente ndaj presionit mekanik. Në natyrë, ka baktere që jetojnë në dete dhe oqeane në një thellësi prej 1000-10000 m nën një presion prej 100 deri në 900 atm. Disa lloje bakteresh mund të përballojnë presione deri në 3000-5000 atm, dhe spore bakteriale - madje edhe 20,000 atm.

Faktorët kimikë

Efekti i kimikateve në mikroorganizmat është i ndryshëm në varësi të natyrës së përbërjes kimike, përqendrimit të tij, kohëzgjatjes së ekspozimit ndaj qelizave mikrobike. Në varësi të përqendrimit, një substancë kimike mund të jetë një burim ushqimi ose të ketë një efekt dëshpërues në aktivitetin jetësor të mikroorganizmave. Për shembull, tretësira e glukozës 0,5-2% stimulon rritjen e mikrobeve, dhe solucionet e glukozës 20-40% vonojnë shumëzimin e qelizave mikrobike.

Shumë përbërje kimike që kanë një efekt shkatërrues në mikroorganizmat përdoren në praktikën mjekësore si dezinfektues dhe antiseptikë.

Kimikatet e përdorura për dezinfektimin quhen dezinfektues. Dezinfektimi kuptohet si masa që synojnë shkatërrimin e mikroorganizmave patogjene në objekte të ndryshme mjedisore. Dezinfektuesit përfshijnë përbërje halloide, fenole dhe derivatet e tyre, kripëra të metaleve të rënda, disa acide, alkale, alkoole, etj. Ato shkaktojnë vdekjen e qelizave mikrobike, duke vepruar në përqendrime optimale për një kohë të caktuar. Shumë dezinfektues kanë një efekt të dëmshëm në indet e makroorganizmit.

Antiseptikët janë kimikate që mund të vrasin mikroorganizmat ose të pengojnë rritjen dhe riprodhimin e tyre. Ato përdoren për qëllime terapeutike (kimioterapi), si dhe për dezinfektimin e plagëve, lëkurës, mukozave të një personi. Karakteristikat antiseptike zotërohen nga peroksidi i hidrogjenit, tretësira alkooli të jodit, jeshile të shkëlqyeshme, tretësira të permanganatit të kaliumit, etj. Disa substanca antiseptike (acetik, sulfurik, acide benzoike, etj.) Në doza të padëmshme për njerëzit përdoren për ruajtjen e ushqimit.

Sipas mekanizmit të veprimit, kimikatet me aktivitet antimikrobik mund të ndahen në disa grupe.

1. Surfaktantët (acide yndyrore, sapunë dhe detergjentë të tjerë) shkaktojnë uljen e tensionit sipërfaqësor, gjë që çon në prishjen e funksionimit të murit qelizor dhe membranës citoplazmike të mikroorganizmave.

2. Fenoli, kresoli dhe derivatet e tyre shkaktojnë mpiksjen e proteinave mikrobike. Ato përdoren për të dezinfektuar materialin infektiv në praktikën mikrobiologjike dhe spitalet e sëmundjeve infektive.

3. Oksidantët, që ndërveprojnë me proteinat mikrobike, prishin veprimtarinë e enzimave, shkaktojnë denatyrimin e proteinave. Klori dhe ozoni janë oksidantë aktivë, të cilët përdoren për dezinfektimin e ujit të pijshëm. Derivatet e klorit (zbardhues, kloraminë) përdoren gjerësisht për qëllime dezinfektimi. Peroksid hidrogjeni, permanganat kaliumi, jod, etj kanë veti oksiduese.

4. Formaldehidi përdoret si solucion 40% (formalina) për dezinfektim. Vret format vegjetative dhe spore të mikroorganizmave. Formalina bllokon amino grupet e proteinave të qelizave mikrobike dhe shkakton denatyrimin e tyre.

5. Kripërat e metaleve të rënda (zhiva, plumbi, zinku, ari, etj.) Mpiksin proteinat e qelizës mikrobike, duke shkaktuar kështu vdekjen e tyre. Një numër i metaleve (argjendi, ari, zhiva, etj.) Kanë një efekt baktervrasës në mikroorganizmat në përqendrime të papërfillshme. Kjo veti quhet veprim oligodinamik (nga latinishtja oligos - i vogël, dinamys - forca). Beenshtë vërtetuar se uji në enët e argjendta nuk kalbet për shkak të veprimit baktervrasës të joneve të argjendit. Për parandalimin e blenorresë * tek të porsalindurit për një kohë të gjatë përdori një solucion 1% të nitratit të argjendit. Zgjidhje koloidale përbërjet organike argjendi (protargol, collargol) përdoret gjithashtu në formën e agjentëve lokal antiseptik.

* (Blenorrea është një pezmatim i konjuktivës së syrit i shkaktuar nga gonokoket.)

Përgatitjet e merkurit kanë një efekt të fortë antimikrobik. Për një kohë të gjatë, bikloruri i merkurit, ose kloruri i merkurit (me një hollim prej 1: 1000) është përdorur për dezinfektim. Sidoqoftë, ai ka një efekt toksik në indet e makroorganizmit dhe përdorimi i tij është i kufizuar.

6. Ngjyrat (jeshile e shkëlqyeshme, rivanol, etj.) Kanë aftësinë të pengojnë rritjen e baktereve. Solucionet e një numri të ngjyrave përdoren si agjentë antiseptikë dhe gjithashtu i shtohen përbërjes së disa mediave ushqyese për të penguar rritjen e mikroflorës shoqëruese.

Efekti shkatërrues i një numri faktorësh fizikë dhe kimikë në mikroorganizmat formon bazën e metodave aseptike dhe antiseptike të përdorura gjerësisht në praktikën mjekësore dhe sanitare.

Asepsa është një sistem masash parandaluese që parandalojnë kontaminimin mikrobial të një sendi (plagë, fushë kirurgjikale, kultura mikroorganizmash, etj.), Bazuar në metodat fizike.

Antiseptikët janë një grup masash që synojnë shkatërrimin e mikroorganizmave në një plagë, të gjithë trupin ose mbi objektet e mjedisit të jashtëm, duke përdorur kimikate të ndryshme dezinfektuese.

Faktorët biologjikë

Në habitatin natyror, mikroorganizmat nuk ekzistojnë të izoluar, por janë në marrëdhënie komplekse, të cilat reduktohen kryesisht në simbiozë, metabolizëm dhe antagonizëm.

Simbioza është bashkëjetesa e organizmave të llojeve të ndryshme që u sjellin atyre përfitim reciprok. Në të njëjtën kohë, ata zhvillohen së bashku më mirë se secili prej tyre veç e veç.

Marrëdhëniet simbiotike ekzistojnë midis baktereve nyjore dhe bishtajoreve, midis kërpudhave filamentoze dhe algave jeshile blu (likenet): Simbioza e baktereve të acidit laktik dhe maja e alkoolit përdoret për të përgatitur disa produkte të acidit laktik (kefir, koumiss).

Metabiosis është një lloj marrëdhënieje në të cilën krijojnë produktet metabolike të një lloji të mikroorganizmave kushtet e nevojshme për zhvillimin e të tjerëve. Për shembull, mikroorganizmat kalbëzues që shpërbëjnë substancat proteinike kontribuojnë në akumulimin e përbërjeve të amonit në mjedis dhe krijojnë kushte të favorshme për rritjen dhe zhvillimin e baktereve nitrifikuese. Dhe zhvillimi i anaerobëve në një tokë të ajrosur mirë do të ishte i pamundur pa aerobe që thithin oksigjen të lirë.

Marrëdhëniet metabiotike janë të përhapura në mes mikroorganizmat e tokës dhe janë baza e ciklit të substancave në natyrë.

Antagonizmi është një formë e marrëdhënies në të cilën një mikroorganizëm pengon zhvillimin e një tjetri ose mund të shkaktojë vdekjen e tij të plotë. Marrëdhëniet antagoniste janë zhvilluar në mikroorganizmat në luftën për ekzistencë. Kudo ku ata jetojnë, ekziston një luftë e vazhdueshme midis tyre për burimet e ushqimit, oksigjenin e ajrit dhe habitatin. Pra, shumica e baktereve patogjene, pasi kanë hyrë në mjedisin e jashtëm (toka, uji) me jashtëqitjet e pacientëve, nuk i qëndrojnë këtu konkurrencës afatgjatë me saprofitet e shumtë dhe vdesin relativisht shpejt.

Antagonizmi mund të jetë për shkak të veprimit të drejtpërdrejtë të mikroorganizmave mbi njëri-tjetrin ose veprimit të produkteve të tyre metabolikë. Për shembull, protozoa gllabëron bakteret, dhe fagët i lyejnë ato. Zorrët e të porsalindurve kolonizohen nga bakteret e acidit laktik Bifidobacterium bifidum. Duke lëshuar acid laktik, ato shtypin rritjen e baktereve kalbëse dhe në këtë mënyrë mbrojnë organizmin akoma të paqëndrueshëm të foshnjave nga Çrregullimet e zorrëve. Disa mikroorganizma në procesin e jetës prodhojnë substanca të ndryshme që kanë një efekt të dëmshëm mbi bakteret dhe mikrobet e tjera. Këto substanca përfshijnë antibiotikë (shih "Antibiotikët").

Pyetjet e kontrollit

1. Cilët faktorë fizikë ndikojnë në aktivitetin jetësor të mikroorganizmave?

2. Cilat substanca klasifikohen si dezinfektues dhe si ndryshojnë ato në mekanizmin e veprimit në mikroorganizmat?

3. Renditni cilat marrëdhënie ekzistojnë midis mikroorganizmave?

Sterilizimi

Sterilizimi është zbrazje, d.m.th., çlirimi i plotë i objekteve mjedisore nga mikroorganizmat dhe sporet e tyre.

Sterilizimi kryhet në mënyra të ndryshme:

1) fizike (ekspozimi ndaj temperaturave të larta, rrezeve UV, përdorimi i filtrave bakterialë);

2) kimike (përdorimi i dezinfektuesve të ndryshëm, antiseptikët);

3) biologjike (përdorimi i antibiotikëve).

Në praktikën laboratorike, zakonisht përdoren metodat fizike të sterilizimit.

Mundësia dhe përshtatshmëria e përdorimit të një ose një metode tjetër të sterilizimit është për shkak të karakteristikave të materialit që do të sterilizohet, vetive fizike dhe kimike të tij.

Metodat fizike

Kalcinimi në një flakë të ndezjes ose flakërimi është një metodë sterilizimi në të cilën objekti është zbrazur plotësisht, pasi të dy qelizat vegjetative dhe sporet e mikroorganizmave vdesin. Zakonisht, kalcinohen sythe bakteriologjike, shpatulla, pipeta, mikroskop dhe rrëshqitje të mbulesës dhe instrumente të vegjël. Gërshërët dhe bisturitë nuk duhet të sterilizohen nga kalcinimi, pasi sipërfaqja e prerjes bëhet e shurdhër nën ndikimin e zjarrit.

Sterilizimi i nxehtësisë së thatë

Sterilizimi me nxehtësi të thatë ose ajër të nxehtë kryhet në furrat Pasteur (furrat e tharjes). Stufa e Pasteur është një dollap me dy mure i bërë nga materiale rezistente ndaj nxehtësisë - metali dhe azbesti. Kabineti nxehet duke përdorur ndezës gazi ose ngrohës elektrik. Kabinetet me ngrohje elektrike janë të pajisura me rregullatorë për të siguruar temperaturën e kërkuar. Për të kontrolluar temperaturën, ekziston një termometër i futur në vrimë në murin e sipërm të kabinetit.

Nxehtësia e thatë përdoret për të sterilizuar kryesisht qelqe laboratorike. Enët e përgatitura për sterilizim nuk ngarkohen fort në furrë për të siguruar ngrohje uniforme dhe të besueshme të materialit që do të sterilizohet. Dera e kabinetit është e mbyllur mirë, pajisja e ngrohjes është e ndezur, temperatura sillet në 160-165 ° C dhe në këtë temperaturë ajo sterilizohet për 1 orë. Në fund të sterilizimit, ngrohja është e fikur, por dollapi dera nuk hapet derisa furra të ftohet; përndryshe, ajri i ftohtë që hyn në dollap mund të shkaktojë çarje në enët e nxehta.

Sterilizimi në një furrë Pasteur mund të kryhet në kushte të ndryshme të temperaturës dhe ekspozimit (koha e sterilizimit) (Tabela 1).

Lëngjet (media kulturore, tretësira izotonike e klorurit të natriumit, etj.), Objektet e bëra prej gome dhe materialeve sintetike nuk mund të sterilizohen me nxehtësi të thatë, pasi lëngjet ziejnë dhe derdhen, dhe goma dhe materialet sintetike shkrihen.

Për të kontrolluar sterilizimin në një furrë Pasteur, fijet e mëndafshit lagen në një kulturë bakteresh që formojnë spore, thahen, vendosen në një pjatë sterile Petri dhe vendosen në një furrë Pasteur. Sterilizimi kryhet në një temperaturë prej 165 ° C për 1 orë (për kontroll, disa prej fijeve lihen në temperaturën e dhomës). Pastaj fijet e sterilizuara dhe të kontrollit vendosen në sipërfaqen e agarit në një enë Petri ose vendosen në tuba me supë dhe inkubohen në një termostat në 37 ° C për 2 ditë. Me funksionimin e duhur të furrës Pasteur, nuk do të ketë rritje në epruvetat ose enët me mjedisin e kulturës, ku ishin vendosur fijet e sterilizuara, pasi sporet bakteriale do të vdesin, ndërsa sporet bakteriale në fijet që nuk janë sterilizuar (kontrolli) do të do të mbinxehet në rritjen e mediave të kulturës.

Për të përcaktuar temperaturën brenda furrës Pasteur, mund të përdorni saharozë ose sheqer të grimcuar me ushqim, të karamelizuar në një temperaturë prej 165-170 ° C.

Përgatitja e qelqit laboratorik për sterilizim në një furrë Pasteur... Para sterilizimit, enët prej qelqi laboratorike (enët Petri, pipetat e graduara dhe Pasteur, shishka, balonë, epruvetat) duhet të lahen plotësisht, të thahen dhe të mbështillen me letër, përndryshe, pas sterilizimit, përsëri mund të kontaminohet me bakteret e ajrit.

Enët Petri mbështillen në letër një ose disa copa ose vendosen në kuti metalike speciale.

Tamponët e pambukut futen në skajet e sipërme të pipetave për të parandaluar hyrjen e materialit të provës në gojë. Pipetat e graduara mbështillen me shirita të gjata letre me gjerësi 4-5 cm. Vëllimi i pipetës së mbështjellur shënohet në letër. Në rastet e lapsave, pipëzat e graduara sterilizohen pa mbështjellje shtesë letre.

shënim... Nëse gradimi në pipeta është dobët i dukshëm, ai rikthehet para sterilizimit. Bojë vaji aplikohet në një pipetë dhe, pa lejuar që bojë të thahet, pluhuri i sulfatit të bariumit fërkohet në të me një leckë. Pas kësaj, hiqni bojën e tepërt me një leckë, e cila mbetet vetëm në nivelet e diplomimit. Pipetat e trajtuara në këtë mënyrë duhet të shpëlahen.

Skajet e mprehta të pipetave Pasteur vulosen në një flakë të ndezjes dhe mbështillen me letër, 3-5 copa secila. Shtë e nevojshme të mbështillen pipetat e Pasteur me kujdes në mënyrë që të mos prishen skajet e mbyllura të kapilarëve.

Shishkat, balonat, epruvetat mbyllen me tapa me garzë pambuku. Ndalesa duhet të futet në qafën e enës për 2/3 e gjatësisë së saj, jo shumë e ngushtë, por as e lirë. Një kapak letre vendoset në majë të tapave për secilën enë (përveç tubave të provës). Tubat lidhen në 5-50 copë dhe mbështillen mbi letër.

shënim... Në temperatura të larta, letra në të cilën mbështillen gotat dhe pipetat dhe leshi i pambukut, bëhen të verdhë dhe madje mund të digjen, prandaj çdo notë e re letre e marrë nga laboratori duhet të testohet në regjimin e pranuar të temperaturës.

Pyetjet e kontrollit

1. Çfarë nënkuptohet me termin sterilizim?

2. Cilat metoda përdoren për sterilizimin?

3. Çfarë sterilizohet nga kalcinimi mbi një zjarr?

4. Përshkruani pajisjen dhe mënyrën e funksionimit të furrës Pasteur.

5. Çfarë sterilizohet në furrën Pasteur?

6. Si përgatiten enët prej qelqi për sterilizim?

7. Pse nuk mund të sterilizohen mjetet e kulturës dhe sendet prej gome në një furrë Pasteur?

Detyrë

Përgatitni enët Petri, pipetat e graduara, pipetat Pasteur, epruvetat, balonat dhe shishet për sterilizim.

Sterilizimi vlim

Zierja është një metodë e sterilizimit, e cila garanton se nuk ka spore në materialin e sterilizuar. Ato përdoren për përpunimin e shiringave të instrumenteve, enëve prej qelqi dhe metali, tubave prej gome, etj.

Sterilizimi me zierje kryhet zakonisht në një sterilizues - një kuti metalike drejtkëndëshe me një kapak të ngushtë. Materiali që do të sterilizohet vendoset në një rrjetë në sterilizues dhe mbushet me ujë. Për të rritur pikën e vlimit dhe për të eleminuar fortësinë e ujit, shtoni 1-2% bikarbonat natriumi (është më mirë të përdorni ujë të distiluar). Sterilizuesi mbyllet me kapak dhe nxehet.Fillimi i sterilizimit konsiderohet momenti i zierjes së ujit, koha e vlimit është 15-30 minuta. Në fund të sterilizimit, rrjeta me instrumentet hiqet nga dorezat anësore me grepa të posaçme dhe instrumentet në të merren me piskatore ose pincë sterile, të cilat zihen së bashku me pjesën tjetër të instrumenteve.

Sterilizimi me avull kryhet në dy mënyra: 1) avulli nën presion; 2) avull që rrjedh.

Sterilizimi me avull nën presion prodhuar në një autoklavë. Kjo metodë e sterilizimit bazohet në ekspozimin e materialeve të sterilizuara ndaj avujve të ngopur të ujit në një presion mbi atmosferën. Si rezultat i një sterilizimi të tillë, me një trajtim të vetëm, të dy format vegjetative dhe spore të mikroorganizmave vdesin.

Autoklavë (Fig. 12) - një kazan masiv, i mbuluar nga jashtë me një shtresë metalike, i mbyllur hermetikisht me një kapak, i cili është i dehur fort në kazan me bulona të varur. Diametri tjetër, më i vogël futet në kazanin e jashtëm, i cili quhet dhomë sterilizimi. Sendet që do të sterilizohen vendosen në këtë dhomë. Midis të dy kaldajave ka hapesire e lire quhet një dhomë e avullit të ujit. Uji derdhet në këtë dhomë përmes një hinkë, të përforcuar nga jashtë, në një nivel të caktuar, të shënuar në një njehsor të veçantë uji. Kur uji zihet në dhomën e avullit, formohet avulli. Dhoma e sterilizimit është e pajisur me një valvul dalës me një valvul sigurie për të lëshuar avull kur presioni rritet mbi vlerën e kërkuar. Një matës presioni përdoret për të përcaktuar presionin e gjeneruar në dhomën e sterilizimit.

Fik. 12. Skema e autoklavës. M - matës presioni; PC - valvul sigurie; B - hinkë për ujë; K 2 - rubinet për daljen e ujit; K 3 - një çezmë për lëshimin e avullit

Presioni normal atmosferik (760 mm Hg) merret si zero. Ekziston një lidhje e caktuar midis leximeve të manometrit dhe temperaturës (Tabela 2).

Aktualisht, ka autoklavë me rregullim automatik të mënyrës së funksionimit. Përveç matësit të zakonshëm të presionit, ato janë të pajisura me një matës presioni kontakti elektrik, i cili parandalon rritjen e presionit mbi një vlerë të paracaktuar dhe në këtë mënyrë siguron qëndrueshmërinë e temperaturës së kërkuar në autoklavë.

Mjete të ndryshme ushqyese (përveç atyre që përmbajnë proteina vendase), lëngje (tretësirë ​​izotonike e klorurit të natriumit, ujë, etj.) Sterilizohen me avull nën presion; pajisje, veçanërisht ato me pjesë gome.

Temperatura dhe kohëzgjatja e mediave të kulturës autoklavike përcaktohet nga përbërja e tyre, e specifikuar në recetën për përgatitjen e mjedisit të kulturës. Për shembull, mediat e thjeshta (mesari i mesopatamisë, supa e mezopatamisë) sterilizohen për 20 minuta në 120 ° C (1 atmosferë). Sidoqoftë, në këtë temperaturë, është e pamundur të sterilizohen mjetet që përmbajnë proteina vendase, karbohidrate dhe substanca të tjera që ndryshohen lehtësisht nga ngrohja. Media me karbohidrate sterilizohet fraksionarisht në 100 ° C ose në një autoklavë në 112 ° C (0,5 atm) për 10-15 minuta. Lëngje të ndryshme, pajisje me zorrë gome, priza, qirinj bakterialë dhe filtra sterilizohen për 20 minuta në 120 ° C (1 atm).

Vëmendje! Në autoklavë, materiali i infektuar gjithashtu neutralizohet. Gota dhe epruvetat që përmbajnë kultura të mikroorganizmave vendosen në kova speciale metalike ose depozita me vrima në kapak për depërtimin e avullit dhe sterilizohen në autoklavë në 126 ° C (1.5 atm) për 1 orë. Instrumentet sterilizohen në të njëjtën mënyrë pasi të punojnë me baktere që gjenerojnë polemikë.

Vetëm personat e trajnuar posaçërisht lejohen të punojnë me autoklavën, të cilët duhet të ndjekin me përpikëri dhe saktësi rregullat e specifikuara në udhëzimet e bashkangjitura në pajisje.

Teknika e autoklavimit... 1. Para punës, kontrolloni aftësinë e shërbimit të të gjitha pjesëve dhe veshin e rubinetave.

2. Uji (i distiluar ose i zier në mënyrë që të mos krijojë peshore) derdhet në ujë (i distiluar ose i zier) përmes një gyp, të fiksuar jashtë bojlerit, deri në shenjën e sipërme të gotës matëse. Çezma nën hinkë është e mbyllur.

3. Materiali që do të sterilizohet vendoset në dhomën e sterilizimit në një rrjetë të veçantë. Sendet nuk duhet të ngarkohen shumë fort, pasi avulli duhet të kalojë lirshëm midis tyre, përndryshe ato nuk do të nxehen deri në temperaturën e dëshiruar dhe mund të mbeten joserile.

4. Rondelja e gomës në kapak fërkohet me shkumës për vulosje më të mirë.

5. Kapaku është i mbyllur dhe i lidhur me rrufe në trupin e autoklavës, dhe bulonat shtrëngohen në çifte në mënyrë të tërthortë.

6. Hapni plotësisht valvulën e kullimit që lidh dhomën e sterilizimit me ajrin e jashtëm dhe filloni të ngrohni autoklavën. Autoklavi zakonisht nxehet me gaz ose energji elektrike.

Kur autoklavi nxehet, uji vlon, avulli i gjeneruar ngrihet midis mureve të kaldajave dhe përmes vrimave të veçanta në murin e bojlerit të brendshëm (shih Fig. 12), hyn në dhomën e sterilizimit dhe del përmes karin e kullimit të hapur. Së pari, avulli del me ajrin në autoklavë. Essentialshtë thelbësore që i gjithë ajri të nxirret jashtë në autoklavë, pasi përndryshe matësi i presionit nuk do të korrespondojë me temperaturën në autoklavë.

Shfaqja e një avulli të vazhdueshëm të fortë të avullit tregon heqjen e plotë të ajrit nga autoklavia; pas kësaj, valvula e daljes mbyllet dhe presioni brenda autoklavës fillon të rritet gradualisht.

7. Fillimi i sterilizimit konsiderohet momenti kur leximet e matësit të presionit arrijnë vlerën e specifikuar. Ngrohja rregullohet në mënyrë që presioni në autoklavë të mos ndryshojë për një periudhë të caktuar kohe.

8. Pasi të ketë kaluar koha e sterilizimit, ngrohja e autoklavës ndalet, avulli lirohet përmes valvulës së daljes. Kur treguesi i matësit të presionit bie në zero, hapni mbulesën. Për të shmangur djegien nga avulli i bllokuar në autoklavë, hapni kapakun drejt jush.

Niveli i temperaturës në autoklavë, dmth leximi i saktë i matësit të presionit, mund të kontrollohet. Për këtë, përdoren substanca të ndryshme që kanë një pikë specifike të shkrirjes: antipirinë (113 ° C), resorcinol dhe squfur (119 ° C), acid benzoik (120 ° C). Njëra nga këto substanca përzihet me një sasi të papërfillshme të ngjyrës (fuchsin ose blu metilen) dhe derdhet në një tub qelqi, i cili vuloset dhe vendoset në një pozicion vertikal midis materialit që do të sterilizohet. Nëse temperatura është e mjaftueshme, substanca do të shkrihet dhe ngjyroset me ngjyrën përkatëse.

Për të kontrolluar efektivitetin e sterilizimit, një tub provë me një kulturë të njohur spore vendoset në autoklavë. Pas autoklavimit, tubi transferohet në një termostat për 24-48 orë, vërehet mungesa ose prania e rritjes. Mungesa e rritjes tregon funksionimin e duhur të pajisjes.

Sterilizimi me avull që rrjedh prodhuar në një aparat Koch. Kjo metodë përdoret në rastet kur objekti që do të sterilizohet ndryshon në një temperaturë mbi 100 ° C. Mediumet ushqyese që përmbajnë ure, karbohidrate, qumësht, patate, xhelatinë, etj sterilizohen me avull që rrjedh.

Aparati (kazani) i Koch është një cilindër metalik i mbështjellur nga jashtë (për të zvogëluar transferimin e nxehtësisë) me ndjerë ose asbest. Cilindri mbyllet me një kapak konik me një dalje avulli. Ekziston një qëndrim brenda cilindrit, në nivelin e të cilit derdhet uji. Një kovë me një vrimë vendoset në stendë, në të cilën vendoset materiali që do të sterilizohet. Aparati Koch nxehet me gaz ose energji elektrike. Koha e sterilizimit llogaritet nga momenti i lëshimit të fuqishëm të avullit në skajet e kapakut dhe nga dalja e avullit. Sterilizohet brenda 30-60 minutash. Në fund të sterilizimit, ngrohja ndalet. Hiqeni kovën me materialin nga aparati dhe lëreni në temperaturën e dhomës deri të nesërmen. Ngrohja kryhet për 3 ditë rresht në një temperaturë prej 100 ° C për 30-60 minuta. Kjo metodë quhet sterilizim fraksionar. Në ngrohjen e parë, format vegjetative të mikrobeve vdesin, dhe ato spore mbeten. Gjatë ditës, sporet kanë kohë të mbijnë dhe të kthehen në forma vegjetative, të cilat vdesin në ditën e dytë të sterilizimit. Meqenëse është e mundur që disa nga sporet nuk kanë pasur kohë të mbijnë, materiali mbahet edhe për 24 orë, dhe më pas kryhet një sterilizim i tretë. Sterilizimi me avull që rrjedh në aparatin Koch nuk kërkon kontroll të veçantë, pasi steriliteti i mediave të përgatitura të kulturës shërben si një tregues i funksionimit korrekt të pajisjes. Ju gjithashtu mund të sterilizoni me avull që rrjedh në një autoklavë me kapak të hapur dhe valvulën e kullimit të hapur.

Pyetjet e kontrollit

1. Cilat mjete kulturore sterilizohen me avull?

2. Çfarë është një sterilizues dhe si funksionon ai?

3. Pse duhet të përdoret uji i distiluar për sterilizimin e vluar?

4. Përshkruani pajisjen dhe mënyrën e funksionimit të autoklavës.

5. Çfarë është e vetmuar?

6. Çfarë shërben për të kontrolluar sterilizimin korrekt gjatë autoklavimit?

7. Çfarë është sterilizimi me avull i lëngët?

8. Përshkruani strukturën e aparatit Koch.

9. Cili është qëllimi i sterilizimit fraksional?

Detyrë

Plotësoni formularin.

Sterilizimi fraksionar mund të kryhet gjithashtu në një koagulues të Koch.

Koaguluesi Koch përdoret për mpiksjen e mediave të kulturës së hirrës dhe vezës, dhe njëkohësisht me ngjeshjen e mjedisit, ai sterilizohet.

Koaguluesi i Koch Shtë një kuti metalike e sheshtë, me dy mure, e mbuluar nga jashtë me material izolues të nxehtësisë. Uji derdhet në hapësirën midis mureve përmes një vrime të veçantë të vendosur në pjesën e sipërme të murit të jashtëm. Vrima mbyllet me një tapë në të cilën futet një termometër. Aparati është i mbyllur me dy mbulesa: qelqi dhe metali. Procesi i rrotullimit mund të vëzhgohet përmes kapakut të xhamit. Tubat me prova vendosen në pjesën e poshtme të mpiksjes në një pozicion të prirur.

Mpirësja nxehet me gaz ose energji elektrike. Mediat sterilizohen një herë në një temperaturë prej 90 ° C për 1 orë ose fraksionale - 3 ditë me radhë në 80 ° C për 1 orë.

Tindalizimi* - Sterilizimi i pjesshëm në temperatura të ulëta - përdoret për substancat që shkatërrohen lehtë dhe denatyrohen në një temperaturë prej 60 ° C (për shembull, lëngje proteinike). Materiali i sterilizuar nxehet në një banjë uji ose në pajisje speciale me termostate në një temperaturë prej 56-58 ° C për një orë për 5 ditë rresht.

* (Metoda e sterilizimit është emëruar pas Tyndall, i cili e propozoi atë.)

Pasterizimi- sterilizimi në 65-70 ° C për 1 orë, i propozuar nga Pasteur për shkatërrimin e formave jo-spore të mikrobeve. Qumështi, vera, birra, lëngjet e frutave dhe produkte të tjerë janë të pasterizuar. Qumështi pasterizohet për ta çliruar atë nga acidi laktik dhe bakteret patogjene (Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella, Salmonella, Staphylococcus, etj.). Kur pasterizoni birrën, lëngjet e frutave, verën, mikroorganizmat që shkaktojnë lloje te ndryshme fermentimi. Ushqimet e pasterizuara mbahen më mirë të ftohta.

Pyetjet e kontrollit

1. Cili është qëllimi dhe pajisja e mpiksjes Koch?

2. Cilat janë metodat e sterilizimit në një mpiksës?

3. Çfarë është tindalizimi?

4. Çfarë është pasterizimi?

Sterilizimi nga rrezatimi ultraviolet

Sterilizimi nga rrezet UV kryhet duke përdorur instalime të veçanta - llamba baktervrasëse. Rrezet UV kanë aktivitet të lartë antimikrobik dhe mund të shkaktojnë vdekjen e jo vetëm të qelizave vegjetative, por edhe të sporeve. Rrezatimi UV përdoret për të sterilizuar ajrin në spitale, salla operacioni, institucione për fëmijë, etj. Në laboratorin mikrobiologjik, kutia trajtohet me rrezet UV para punës.

Pyetjet e kontrollit

1. Cilat janë vetitë e rrezeve ultraviolet?

2. Në cilat raste përdoret sterilizimi UV?

Sterilizimi mekanik me filtra bakterial

Sterilizimi me filtër përdoret kur sendet që do të sterilizohen ndryshojnë kur nxehen. Filtrimi kryhet duke përdorur filtra bakterialë të bërë nga materiale të ndryshme imët poroze. Poret e filtrit duhet të jenë mjaft të vogla (deri në 1 μm) për të siguruar mbajtje mekanike të baktereve, prandaj disa autorë i referohen filtrimit metodat mekanike sterilizimi.

Metoda e filtrimit sterilizon mjediset e kulturës që përmbajnë proteina, serum, disa antibiotikë dhe gjithashtu ndan bakteret nga viruset, fagët dhe ekzotoksinat.

Në praktikën mikrobiologjike, përdoren filtrat e azbestit Seitz, filtrat e membranës dhe filtrat (qirinjtë) e Chamberlan dhe Berkefeld.

Filtrat Seitz janë disqe të bëra nga një përzierje e asbestit dhe celulozës. Trashësia e tyre është 3-5 mm, diametri është 35-140 mm. Industria vendase prodhon filtra të dy markave: "F" (filtrim) - mbajtja e grimcave të pezulluara, por lejimi i baktereve; "SF" (sterilizues) - me poret më të vogla, që mbajnë bakteret, por lejojnë viruse. Pllakat e thithura të asbestit, si dhe pllakat me pushime dhe çarje, janë të papërshtatshme për punë.

Filtrat e membranës bëhen nga nitroceluloza. Ata janë disqe e bardhe 0,1 mm të trasha dhe 35 mm në diametër. Në varësi të madhësisë së poreve, ato përcaktohen nr. 1, 2, 3, 4 dhe 5 (Tabela 3).

Filtri Nr. 1 është më i përshtatshmi për sterilizimin. Përveç atyre të listuar, prodhohet gjithashtu një i ashtuquajtur para-filtër, i krijuar për të liruar lëngun e filtruar nga grimcat e mëdha që përmbahen në të.

Filtrat Chamberlain dhe Berkefeld (qirinjtë) janë cilindra të zbrazët të mbyllur në një skaj. Qirinjtë Chamberlain janë bërë nga kaolinë të përzier me rërë dhe kuarc. Ato janë të standardizuara për sa i përket madhësive të poreve dhe përcaktohen L 1, L 2, L 3 ... L 13. Filtrat (qirinjtë) e Berkefeld përgatiten nga toka infuzore, sipas madhësisë së poreve të tyre ato përcaktohen V, N, W, që korrespondon me një diametër të poreve prej 3-4, 4-7, 8-12 mikronë.

Puna me filtra bakterialë kryhet si më poshtë. Filtri duhet të fiksohet në një mbajtëse të veçantë që futet në enën e filtrit. Marrësi është zakonisht një balonë Bunsen. Mbajtësit, në shumicën e rasteve të bëra prej çeliku inox, përbëhen nga dy pjesë: pjesa e sipërme, e cila ka formë si cilindër pa fund dhe pjesa e poshtme, e cila përfundon në një tub. Filtrat Seitz vendosen me sipërfaqen e përafërt lart në një rrjetë metalike dhe mbërthehen fort me vida midis pjesës së sipërme dhe të poshtme të mbajtësit. Filtri i mbledhur është i fiksuar në një tapë gome të futur në qafën e balonës Bunsen. Një shtupë pambuku futet në tubin e daljes në balonë, i cili është i lidhur me një pompë vakumi. Instalimi i përgatitur mbështillet me letër dhe sterilizohet në një autoklavë nën një presion prej 1 atm për 20-30 minuta. E gjithë pajisja e mbledhur quhet gjithashtu filtri Seitz (Fig. 13).

Menjëherë para filtrimit, fundi i degës së balonës Bunsen është i lidhur me një tub gome me një pompë vaji ose uji uji. Lidhjet e pjesëve të ndryshme janë të mbushura me parafinë për të krijuar ngushtësi. Lëngu i filtruar derdhet në cilindrin e aparatit dhe pompa ndizet, duke krijuar një vakum në marrës. Si rezultat i ndryshimit të presionit që rezulton, lëngu i filtruar kalon nëpër poret e filtrit në marrës, dhe mikrobet mbeten në sipërfaqen e filtrit.

Filtrat e membranës sterilizohen duke zierë në ujë të distiluar para përdorimit. Për të parandaluar përdredhjen e filtrave, ato vendosen fillimisht në ujë të distiluar të nxehtë në një temperaturë prej 50-60 ° C, dhe zihen në zjarr të ulët për 30 minuta, duke ndryshuar ujin 2-3 herë. Mbajtësi i filtrit dhe ena janë sterilizuar paraprakisht, pajisja është montuar në kushte aseptike. Për të mos grisur filtrin e membranës në rrjetën metalike, kriklla me letër filtri sterile vendosen nën të. Pastaj, me piskatore sterile me këshilla të lëmuara, merrni filtrin e membranës nga sterilizuesi dhe vendoseni në rrjetin mbështetës me sipërfaqen me shkëlqim poshtë.

Qirinjtë (Chamberlain) të sterilizuar në një autoklavë lidhen me anë të një tubi gome me një marrës dhe ulen në një enë (zakonisht në një cilindër) me lëngun që do të filtrohet. Filtrimi zhvillohet duke përdorur një pompë vakumi. Një filtër steril hyn në marrës dhe bakteret mbahen nga poret e qiriut.

Filtrat e membranës dhe azbestit janë të disponueshëm. Pas përdorimit, qirinjtë zihen në ujë çezme, pastaj kalcinohen në një furrë me mbytje.

Para përdorimit të mëvonshëm, qirinjtë kontrollohen për integritet. Qiri zhytet në një enë me ujë dhe ajri kalon përmes. Nëse në sipërfaqen e qiriut shfaqen flluska ajri, atëherë në qiri janë formuar çarje dhe është e papërdorshme.

Pyetjet e kontrollit

1. Cila është metoda e sterilizimit me filtër? Çfarë sterilizohet me këtë metodë?

2. Cilët filtra bakteresh njihni? Si është montuar pajisja filtër, cilat kushte duhet të respektohen?

Metodat kimike

Ky lloj sterilizimi përdoret në një masë të kufizuar dhe shërben kryesisht për të parandaluar kontaminimin bakterial të mediave të kulturës dhe përgatitjeve imunobiologjike (vaksinat dhe serumet).

Substancat si kloroformi, tolueni, eteri shtohen më shpesh në mediet ushqyese. Nëse është e nevojshme të lirohet mediumi nga këto konservantë, ajo nxehet në një banjë uji në 56 ° C (avujt avullojnë).

Për të ruajtur vaksinat, serumet, ata përdorin merthiolate, acid borik, formalinë, etj.

Sterilizimi biologjik

Sterilizimi biologjik bazohet në përdorimin e antibiotikëve. Kjo metodë përdoret në kultivimin e viruseve.

Pyetjet e kontrollit

1. Çfarë është sterilizimi kimik dhe kur përdoret?

2. Çfarë është sterilizimi biologjik?

Metodat kryesore të sterilizimit janë paraqitur në tabelë. katër

1 (Sterilizimi jo i plotë: sporet mbeten në materialin për tu sterilizuar.)

2 (Sterilizimi jo i plotë: viruset mbeten në materialin që duhet të sterilizohet.)

Dezinfektimi

Në praktikën mikrobiologjike, përdoren dezinfektues të ndryshëm: tretësira 3-5% të fenolit, 5-10% tretësira lizolike, 1-5% solucione kloramine, 3-6% tretësira të peroksidit të hidrogjenit, 1-5% solucione formaline, tretësira të klorurit merkur në një hollimi i 1: 1000 (0,1%), 70 ° alkool, etj.

Materiali patologjik i mbeturinave (qelb, feces, urinë, pështymë, gjak, lëng cerebrospinal) dezinfektohet para se të derdhet në kanalizim. Dezinfektimi kryhet me zbardhues të thatë ose tretësirë ​​kloramine 3-5%.

Pipeta të kontaminuara me material patologjik ose kultura të mikroorganizmave (të shkallëzuara dhe Pasteur), shpatulla qelqi, rrëshqitje dhe rrëshqitje mbulese zhyten në kavanoza qelqi me një tretësirë ​​3% të fenolit ose peroksidit të hidrogjenit për një ditë.

Në fund të punës me material infektiv, tekniku i laboratorit duhet të trajtojë me një solucion dezinfektues vendi i punës dhe duart. Sipërfaqja e tryezës së punës fshihet me një copë leshi pambuku të lagur me një tretësirë ​​fenoli 3%. Duart dezinfektohen me tretësirë ​​kloramine 1%. Për ta bërë këtë, lagni një pambuk ose një pecetë garzë me një solucion dezinfektues dhe fshijeni dorën e majtë, pastaj të djathtën dhe më pas lani duart ujë të ngrohtë me sapun.

Zgjedhja e një dezinfektuesi, përqendrimi dhe kohëzgjatja e tij e ekspozimit (ekspozimit) varen nga vetitë biologjike të mikrobeve dhe nga ambienti në të cilin dezinfektuesi do të vihet në kontakt me mikroorganizmat patogjene. Për shembull, kloruri i merkurit, fenoli, alkoolet janë të papërshtatshëm për dezinfektimin e substrateve të proteinave (qelb, gjak, pështymë), pasi nën ndikimin e tyre ndodh koagulimi i proteinave dhe proteina e mpiksur mbron mikroorganizmat nga efektet e dezinfektuesve.

Kur dezinfektoni materialin e infektuar me forma spore të mikroorganizmave, përdoret një tretësirë ​​5% e kloraminës, 1-2.5% tretësira të kloraminës së aktivizuar, 5-10% solucione të formalinës dhe substanca të tjera.

Dezinfektimi, i cili kryhet gjatë gjithë ditës gjatë punës, quhet aktual, dhe në fund të punës - përfundimtar.

Dezinfektues dhe receta për përgatitjen e zgjidhjeve të punës prej tyre... Zbardhuesi është një pluhur i bardhë me gunga me erë të mprehtë klori; nuk tretet plotësisht në ujë. Efekti baktervrasës varet nga përmbajtja e klorit aktiv, sasia e së cilës varion nga 28 deri në 36%. Zbardhuesi që përmban më pak se 25% klor aktiv nuk është i përshtatshëm për dezinfektim.

Nëse ruhet në mënyrë jo të duhur, zbardhuesi zbërthehet dhe humbet një pjesë të klorit aktiv. Zbërthimi promovohet nga nxehtësia, lagështia, rrezet e diellit, kështu që ruajeni zbardhues duhet të jetë në një vend të thatë dhe të errët, në një enë të mbyllur fort.

Zbardhues i thatë përdoret për të dekontaminuar sekrecionet e njerëzve dhe kafshëve (me shpejtësinë 200 g për 1 litër feçe dhe 10 g për 1 litër urinë).

Përgatitja e tretësirës origjinale zbardhuese prej 10%. Merrni 1 kg zbardhues të thatë, vendoseni në një kovë smalt dhe bluajeni. Pastaj derdh ujë të ftohtë në një vëllim prej 10 litra, përziejeni mirë, mbuloni me një kapak dhe lëreni për një ditë në një vend të freskët. Pas kësaj, zgjidhja e pastruar 10% e sqaruar kullohet me kujdes dhe filtrohet përmes disa shtresave garzë ose filtrohet përmes një pëlhure të dendur. Ruhet në shishe qelqi të errëta, të mbyllura me një tapë druri, në një vend të freskët, jo më shumë se 10 ditë. Solucionet e punës me përqendrimin e kërkuar përgatiten nga solucioni stok menjëherë para përdorimit të tyre. Sasia e tretësirës bazë të kërkuar për përgatitjen e 0,2-10% solucioneve të sqaruara të zbardhuesit jepet në tabelë. pesë

Përqendrimi i solucioneve të zbardhura të zbardhuesve nga 0.2 në 10% zgjidhet në varësi të natyrës së objektit që do të dezinfektohet dhe qëndrueshmërisë së patogjenit.

Kloramina është një substancë kristalore e bardhë ose e verdhë, përmban 24-28% të klorit aktiv. Ai tretet mirë në ujë në temperaturën e dhomës, kështu që solucionet e tij përgatiten menjëherë para dezinfektimit. Ata përdorin solucione kloramine 0,2-10%. Raporti midis përqendrimit të përqindjes së tretësirës dhe sasisë së kloraminës në gram për 1 dhe 10 litra jepet në tabelë. 6

Tretni kloraminën në një enë qelqi ose smalt. Kur ruani solucione kloramine në një enë qelqi të errët me një tapë të grirë, aktiviteti i tyre vazhdon deri në 15 ditë.

Kloramina e aktivizuar. Karakteristikat dezinfektuese të kloraminës rriten kur i shtohet një aktivizues në raport prej 1: 1 ose 1: 2. Si një aktivizues, përdoren përbërjet e amonit - klorur, sulfat, nitrat amoni. Kloramina e aktivizuar përdoret në një përqendrim prej 0.5, 1 dhe 2.5%. Përgatitini ato pak para përdorimit. Kloramina dhe kripa e amonit peshohen veçmas. Së pari, kloramina tretet në ujë, dhe pastaj shtohet aktivatori.

Avantazhi i tretësirave të aktivizuara të kloraminës ndaj atyre konvencionale është se kur shtohet një aktivizues, çlirimi i klorit aktiv përshpejtohet. Prandaj, ilaçi ka një efekt të dëmshëm jo vetëm në format vegjetative të mikroorganizmave, por edhe në sporet e tyre. Kloramina e aktivizuar përdoret në përqendrime më të ulëta dhe në ekspozim më të ulët.

Fenoli (acidi karbolik) është një kristal i pangjyrë në formë gjilpëre me një erë karakteristike të mprehtë. Nën ndikimin e dritës, ajrit dhe lagështisë, kristalet marrin një ngjyrë të kuqe të mjedrës. Ruhet në vazo qelqi të mbyllura dhe të mbrojtura nga drita.

Fenoli është i tretshëm në ujë, alkool, eter, vajra yndyrore. Duke qenë shumë higroskopike, ajo thith lagështi nga mjedisi dhe bëhet e lëngshme. Acidi i lëngshëm karbolik përmban 90% fenol kristalor dhe 10% ujë.

Vendosni 3-5% solucione ujore të acidit karbolik të përgatitur nga fenoli kristalor dhe acidi i lëngshëm karbolik sipas skemës së dhënë në tabelë. 7. Aktiviteti i fenolit rritet kur tretet në të ujë i nxehtë(40-50 ° C).

Vëmendje! Fenoli kristalor ose acidi i lëngshëm karbolik në kontakt me lëkurën mund të shkaktojë acarim të lëkurës, dhe në përqendrime të larta, djegie të rënda. Prandaj, duhet pasur shumë kujdes gjatë trajtimit të acidit karbolik. Kur bëni zgjidhje, duhet të vishni doreza gome ose, në raste ekstreme, të lyeni duart me vazelinë.

Në rast të kontaktit të acidit karbolik në lëkurë, lajeni atë menjëherë me ujë të ngrohtë dhe sapun ose alkool etilik 40 °.

Shënim. Për përgatitjen e solucioneve dezinfektuese të fenolit, është më e përshtatshme dhe më e sigurt të përdoret acid i lëngshëm karbolik.

Pyetjet e kontrollit

1. Cilat dezinfektues përdoren në praktikën mikrobiologjike?

2. Përshkruaj pamja e jashtme dhe vetitë kryesore të zbardhuesit, kloraminës, fenolit.

3. Cilat tretësira të dezinfektuesve përdoren për të dezinfektuar materialin e infektuar me forma spore të mikroorganizmave?

Detyrë

Përgatitni 2 litra tretësirë ​​pune 5% të zbardhuesit të sqaruar; 500 ml tretësirë ​​kloramine 3%, 300 ml tretësirë ​​kloramine 1% të aktivizuar.

Vëmendje! Para se të vazhdoni me përgatitjen e zgjidhjeve, bëni llogaritjet.

Përmes faktorëve fizikë dhe kimikë.

Faktorët fizikë të sterilizimit përfshijnë nxehtësinë, rrezet ultraviolet, rrezatimin jonizues dhe përmes filtrave bakterialë.

Në praktikën laboratorike, sterilizimi me temperaturë të lartë arrihet duke kalcinuar në flakë, duke ngrohur me nxehtësi të thatë, duke zier, duke përpunuar me avull ose avull që rrjedh nën presion.

Fik. 1. Djegësi Bunsen. Fik. 2. Djegës Teklu. Fik. 3. Shpërndarja e temperaturës në flakën e ndezësit.

Fik. 4. Kabineti i tharjes.

Fik. 5. Banjot e ujit: 1 - me një prurje të vazhdueshme të ujit; 2 - cilindrike; 3 - me fund të rrumbullakët. Fik. 6. Sterilizues me avull i lëngshëm.

Sterilizimi i flakës është një metodë e thjeshtë dhe e besueshme për përpunimin e objekteve të ndryshme rezistente ndaj nxehtësisë: hala, sythe bakteriale, shpatulla mikrobiologjike, pipeta, syze rrëshqitëse dhe mbulesa, piskatore, etj. ndezës gazi Sistemet Bunsen (Fig. 1) ose Teklu (Fig. 2). Burner Bunsen është i pajisur me një mbajtës të lëvizshëm, duke lëvizur të cilin është e mundur të rregulloni rrjedhën e ajrit. Në ndezësin Teklu, sasia e ajrit në hyrje rregullohet duke lëvizur diskun (Fig. 2.1), sasia e gazit - me vidë (Fig. 2, 2). Në mungesë ose qasje joadekuate të ajrit, formohet një flakë e tymosur. Hyrja e ajrit në ndezës rregullohet derisa të merret një flakë blu. Një shpërndarje e përafërt e temperaturës në flakën e ndezësit tregohet në Fig. 3

Sterilizimi i nxehtësisë së thatë kryhet në një kabinet tharëse (furrë Pasteur). Kjo metodë sterilizon vetëm sende të thata - qelqe laboratorike, etj. Kabineti i tharjes (Fig. 4) është një dollap i vogël hekuri me mure të dyfishta, midis të cilit futet material izolues (azbest, lesh xhami). Epruvetat dhe shishkat e lara pastrohen mbyllur me tapa pambuku; pipetat, leshi pambuku, garza mbështillen me letër dhe vendosen në raftet e dollapit në mënyrë që sendet e sterilizuara të mos prekin muret e nxehta të pajisjes dhe ajri i nxehtë depërton lirshëm midis tyre. Sterilizimi në furrë zgjat 45 minuta - 1 orë në t 160-170 °, Në temperatura mbi 175 °, letra dhe leshi i pambukut digjen.

Zierja në ujë shkatërron format jo-spore të mikrobeve në 1-3 minuta. , hala, thika, mjete të vogla, etj mund të zihen në sterilizues metali dhe madje edhe në një tenxhere të rregullt. Shtimi i një sasie të vogël bikarbonat natriumi (bikarbonat)